中国动物传染病学报

2020, v.28;No.137(05) 31-36

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鸭源新型鹅细小病毒TaqMan荧光定量PCR方法的建立及初步应用
DEVELOPMENT AND PRELIMINARY APPLICATION OF A TAQMANBASED REAL-TIME PCR ASSAY FOR DETECTION OF NOVEL GOOSE PARVOVIRUS

曹旭阳;王宇飞;张志飞;魏笑笑;秦立廷;陈佶慧;滕巧泱;杨健美;刘芹防;陈鸿军;李泽君;李景环;李雪松;

摘要(Abstract):

2015年暴发了一种由新型鹅细小病毒(NGPV)引起的鸭喙萎缩-侏儒症(BADS)的疾病,造成了严重的经济损失。本研究根据GenBank中NGPV相对保守的VP3基因序列,设计1对特异性引物和1条TaqMan探针,并对其反应条件进行优化,建立了一种检测NGPV的TaqMan荧光定量PCR方法。敏感性试验结果表明,该方法检测敏感性达到37.2拷贝/μL,比常规PCR灵敏度高100倍,而且该方法对鸭其他主要病原核酸检测均为阴性,具有良好的特异性。批内和批间的检测变异系数均小于等于2.2%。对收集的50份病料进行检测,本研究建立的荧光定量PCR方法NGPV检出率为78%,普通PCR方法为50%,荧光定量PCR方法的敏感性明显高于普通常规PCR方法。研究结果表明该方法具有操作简便、敏感性高和特异性强的特点,可用于NGPV的快速诊断。

关键词(KeyWords): 新型鹅细小病毒;荧光定量PCR;检测

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家重点研发计划“家禽重要疫病诊断与检测新技术研究”(2016YFD0500800);; 国家自然科学基金项目(31702237,31771000);; 上海市自然科学基金项目(17ZR1437400);; 上海科委创新行动计划农业项目(17391901700)

作者(Author): 曹旭阳;王宇飞;张志飞;魏笑笑;秦立廷;陈佶慧;滕巧泱;杨健美;刘芹防;陈鸿军;李泽君;李景环;李雪松;

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DOI:

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