中国动物传染病学报

2020, v.28;No.137(05) 42-47

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寨卡病毒结构蛋白基因的原核表达及其多克隆抗体的制备
PROKARYOTIC EXPRESSION AND PREPARATION OF POLYCLONAL ANTIBODIES OF STRUCTURAL PROTEINS OF ZIKA VIRUS

张经伟;王晗;刘靖;马乐;李伟;步志高;华荣虹;

摘要(Abstract):

寨卡病毒(ZIKV)是一种重要的人兽共患病病原。为了在原核表达系统表达ZIKV C、prM和E蛋白并制备相应多克隆抗体,本研究首先对ZIKV C、prM和E蛋白基因序列进行密码子优化,合成后克隆至pMAL-c5x载体中,重组质粒转化于E.coli ER2523,IPTG诱导表达产物用SDS-PAGE及Western blot进行鉴定并通过MBP亲和层析柱进行纯化;将纯化蛋白免疫新西兰大白兔,制备C、prM和E蛋白的兔源多克隆抗体;用IFA和Western blot检测血清抗体效价及特异性。结果显示:本研究利用原核表达系统成功表达了ZIKV C、prM和E蛋白,经过MBP亲和层析柱纯化后获得高纯度的目的蛋白;将ZIKV C、prM和E蛋白免疫新西兰大白兔后均诱导产生特异性多克隆抗体,间接免疫荧光试验表明所制备多克隆抗体均能与ZIKV结合,IFA效价分别为1:1600,1:1600和1:3200;Western blot显示制备的多克隆抗体能特异性识别ZIKV C、prM和E蛋白。该研究结果为进一步开展ZIKV相关研究奠定了基础。

关键词(KeyWords): 寨卡病毒;结构蛋白;多克隆抗体

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家重点研发计划项目(2016YFD0500403)

作者(Author): 张经伟;王晗;刘靖;马乐;李伟;步志高;华荣虹;

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DOI:

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