- 侯天龙;包旦奇;李泽君;刘芹防;刘焕奇;
流感病毒为囊膜病毒,以出芽的方式释放病毒。M1蛋白是流感病毒的基质蛋白,在维持病毒颗粒形态与病毒的致病性中发挥重要作用。M2蛋白是离子通道蛋白,在病毒出芽过程中发挥重要作用。研究显示M1蛋白与M2蛋白存在相互作用,但是这种互作在病毒出芽中的功能尚不清楚。根据M1蛋白的结构,M1蛋白分成N端、C端和中间区域3个区域,与M2蛋白相互作用的区域也不清楚。本文利用双分子荧光互补实验与病毒出芽实验方法研究了M1蛋白与M2蛋白互作的区域及这种互作在病毒出芽中的作用。研究结果显示,M2蛋白通过与M1蛋白的N端1~160个氨基酸相互作用,从而帮助M1蛋白出芽;M1蛋白的1~20氨基酸与140~160氨基酸在决定M1蛋白的稳定性与功能发挥中具有重要作用,缺失这2个氨基酸序列可导致M1蛋白N端1~160个氨基酸蛋白不稳定,并不能与M2蛋白互作。本研究揭示了3H1N1流感病毒M1蛋白与M2蛋白互作功能区域、以及他们之间相互作用在流感病毒出芽中发挥的重要作用。
2016年06期 v.24;No.114 1-5页 [查看摘要][在线阅读][下载 1728K] [阅读次数:128 ] |[下载次数:272 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:10 ] - 张欢;肖文婕;曾哲;朱心宇;董楠;彭贵青;
猪δ冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCo V)是一种新发现的肠道冠状病毒,可引起仔猪的腹泻。冠状病毒编码的非结构蛋白Nsp5是一种3C样蛋白酶,在病毒多聚前体蛋白加工以及免疫调节中发挥重要作用。本研究以PDCo V CHN-HN-2014株为模板,通过RT-PCR扩增Nsp5基因并将其克隆到原核表达载体p ET-28a(+)中,构建了重组表达质粒。将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后SDS-PAGE检测,结果表明Nsp5可在大肠杆菌中高效、可溶性表达。采用镍亲和层析对表达的Nsp5蛋白进行纯化,并通过荧光共振能量转移方法检测了其蛋白酶活性,结果表明纯化的Nsp5蛋白能够有效切割含有PDCo V Nsp5氨基端自切割位点的十二肽底物,证实体外表达的Nsp5重组蛋白具有良好的蛋白酶切割活性。猪δ冠状病毒Nsp5蛋白的克隆、表达及其蛋白酶活性检测,为深入研究该蛋白的功能奠定了基础。
2016年06期 v.24;No.114 6-11页 [查看摘要][在线阅读][下载 1309K] [阅读次数:100 ] |[下载次数:277 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] - 童武;李国新;郑浩;刘飞;梁超;李林;田青;曹艳云;武吉强;王涛;郑旭晨;单同领;童光志;
本研究将猪伪狂犬病毒双基因缺失毒株(JS-2012-△g I/g E株)用0.15%的甲醛灭活后,与赛彼科公司MONTANIDE ISA201VG佐剂进行乳化,制备成猪伪狂犬病灭活疫苗。为了评价灭活疫苗的免疫效力,15头14日龄的健康仔猪(猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒和猪圆环病毒Ⅱ型抗原和抗体均为阴性)随机分成3组,每组5头。第一组猪颈部肌肉接种猪伪狂犬病灭活疫苗(JS-2012-△g I/g E株)每头2 m L,接种后28 d,第一组和第二组同样方式同等剂量接种猪伪狂犬病灭活疫苗(JS-2012-△g I/g E株),第三组猪作为对照。第二次免疫后d 28,三组实验猪均滴鼻接种PRV JS-2012第5代强毒,每头105.0TCID50/2 m L。攻毒后0~14 d,每日测量体温并记录临床症状。通过抗体检测和保护效率来评价猪伪狂犬病灭活疫苗(JS-2012-△g I/g E株)免疫效力。结果表明,两次免疫(第一组)PRV g B抗体水平明显高于一次免疫(第二组),两次免疫提供了更好的保护效力。
2016年06期 v.24;No.114 12-18页 [查看摘要][在线阅读][下载 1832K] [阅读次数:184 ] |[下载次数:491 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:17 ]
- 刘东良;钟登科;李蓓蓓;赵秋华;张克龙;石坤;魏建超;
本研究旨在调查上海市猪源多杀性巴氏杆菌对临床常用抗菌药的耐药情况,为该病的药物预防与治疗提供科学依据。2014~2015年在上海市11个规模化养猪场采集疑似多杀性巴氏杆菌感染的病料共计116份,采用细菌分离培养及PCR方法,分离鉴定出20株多杀性巴氏杆菌。采用纸片法测定了分离菌株对20种临床常用抗菌药的敏感性,结果表明,所有菌株对阿莫西林克拉维酸、头孢曲松、恩诺沙星、氟苯尼考、阿奇霉素和多黏菌素B敏感,这6种药物可作为本地区控制本病的首选药物。然而,超过50%的菌株对青霉素(65.0%)、复方新诺明(65.0%)、氨苄西林(60.0%)、链霉素(60.0%)、四环素(60.0%)耐药。耐药谱分析显示,85.0%的菌株对4~7种抗菌药耐药。本研究结果表明上海市猪源多杀性巴氏杆菌对临床常用抗菌药物耐药较严重,应加强养殖场猪多杀性巴氏杆菌的耐药性监测与防控。
2016年06期 v.24;No.114 19-23页 [查看摘要][在线阅读][下载 1055K] [阅读次数:122 ] |[下载次数:254 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:11 ] - 杨立军;韩先干;尹会方;罗燕秋;左佳坤;徐达;吕小龙;吴小卡;周键;王少辉;李金贵;于圣青;
本研究对2015年分离自福建省龙岩市的139株禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)的血清型、毒力因子分布及耐药性等进行检测,并对血清型与耐药性、毒力因子分布和耐药性之间的相关性进行分析,以期为APEC的防控提供参考。对139株分离菌株的血清型检测结果表明,O1血清型(11株)、O2血清型(14株)和O78血清型(14株)占全部菌株的28%;对分离菌株毒力基因检测结果表明,4%和7.1%的菌株检测到papC基因和vat基因,14.3%和19.3%的菌株检测到aat A基因和cva/cvi基因。而iuc D(82%)、tsh(59%)、iss(55%)和irp2(44.6%)基因在分离菌株中具有较高的检出率;药敏实验结果表明,分离株存在多重耐药性,99%以上分离菌株对红霉素、克林霉素和利福平耐受,86%的分离菌株对10种以上抗生素耐受,57.3%的菌株对13种药物都耐受;对血清型、耐药性与致病性之间的分析结果表明,分离的O1、O2和O78血清型的菌株,其中50%的菌株是含有5种以上毒力基因的强毒株,且在分离的含有5种以上毒力基因的强毒株中,50%的菌株对13种抗生素耐受,90%的菌株对10种以上药物耐受。
2016年06期 v.24;No.114 24-29页 [查看摘要][在线阅读][下载 1091K] [阅读次数:137 ] |[下载次数:333 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:13 ]
- 詹婷婷;米荣升;黄燕;陆珂;程龙;贾海燕;胡盼;宋悦;韩先干;赵权;陈兆国;
为了解我国重庆市、广州市和上海市3个典型城市屠宰环节和销售环节猪肉中弓形虫的携带情况,在这3个城市共采集猪膈肌样品393份,分别进行胃蛋白酶消化并提取基因组DNA,以弓形虫529 bp重复序列为目的基因,进行PCR扩增。结果显示,3个城市猪膈肌肉中弓形虫的阳性率为5.34%,其中重庆市的阳性率最高,达9.83%;其次是上海市,为3.17%;而广州市则未检出阳性样品。夏季和秋季间、屠宰环节和销售环节间的阳性率差异均不具备显著统计学意义。本研究结果为减少弓形虫对上述地区人群的危害,预防和控制弓形虫病流行,指导猪群的饲养管理以及提高畜牧业经济效益提供了有益指导。
2016年06期 v.24;No.114 30-35页 [查看摘要][在线阅读][下载 1238K] [阅读次数:126 ] |[下载次数:114 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] - 徐帅兵;黄兵;赵其平;董辉;朱顺海;崔晓霞;谢雨翔;唐敏;杨志远;韩红玉;
为了筛选柔嫩艾美耳球虫子孢子入侵相关的蛋白,利用酵母双杂交体系构建了柔嫩艾美耳球虫子孢子酵母双杂交cDNA文库。提取纯化的子孢子总RNA,经MMLV-RT反转录合成cDNA第一链后,利用LD-PCR扩增合成双链cDNA(ds cDNA),dscDNA经纯化柱CHROMA SPINT+TE-400 Columns纯化剔除小于200 bp的片段。将纯化后dscDNA、pGADT7-Rec及Carrier DNA共转化到已经制备好的酵母感受态细胞Y187中,dscDNA与pGADT7-Rec以同源重组的方式在细胞内进行连接,经过缺陷性培养基(SD/-Leu)的筛选得到酵母双杂交cDNA文库。结果显示,构建的柔嫩艾美耳球虫子孢子酵母双杂交cDNA文库的转化率为4.33×105/μg pGADT7-Rec,文库滴度为3.62×107 cfu/m L。随机挑取32个单克隆进行PCR检测,插入片段大小为200~2000bp,重组率为93.75%,并以该文库作为模板,用柔嫩艾美耳球虫5对特异性引物进行PCR扩增,获得了这5个基因片段。结果表明成功构建了柔嫩艾美耳球虫子孢子酵母双杂交cDNA文库,为进一步筛选和研究球虫入侵互作蛋白奠定了基础。
2016年06期 v.24;No.114 36-42页 [查看摘要][在线阅读][下载 1223K] [阅读次数:166 ] |[下载次数:81 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] - 阎晓菲;时从来;黄兵;张新玲;童婷;陈琴;陈万里;杨帅;
为了筛选有效的抗绵羊球虫药物,选择地克珠利(diclazuril)、磺胺二甲嘧啶(sulfadimidine)、克球粉(clopidol)3种常用的抗鸡球虫药物,进行绵羊自然感染球虫的治疗试验,以每克粪便球虫卵囊数(oocysts per gramme,OPG)、动物转阴率、增重率、增重新增产值作为评判指标,评价其抗绵羊球虫的驱虫效果。结果表明,3种药物对成年绵羊球虫感染均具有较好的治疗效果,其中地克珠利效果最好,克球粉次之,磺胺二甲嘧啶稍差。磺胺二甲嘧啶对羔羊球虫感染的治疗效果较差,而地克珠利和克球粉均具有良好的治疗效果,且二者的效果相当。3种药物对阿撒他艾美耳球虫(Eimeria ahsata)、巴库艾美耳球虫(Eimeria bakuensis)、类绵羊艾美耳球虫(Eimeria ovinoidalis)等3种致病性羊球虫感染均具有较好的治疗效果,其中地克珠利和克球粉效果最好,而磺胺二甲嘧啶稍差。在整个试验期间,不给药组成年羊和羔羊的增重和新增产值均为负值,而三个用药组的体重和产值均增加,其中地克珠利组稍好于克球粉组和磺胺二甲嘧啶组。
2016年06期 v.24;No.114 43-49页 [查看摘要][在线阅读][下载 1023K] [阅读次数:100 ] |[下载次数:171 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] - 谢雨翔;韩红玉;赵其平;王自文;董辉;徐帅兵;朱顺海;崔晓霞;唐敏;杨志远;黄兵;
为检测实验室长期保存的柔嫩艾美耳球虫马杜拉霉素抗药株和地克珠利抗药株的遗传稳定性,采用鸡体试验法,以抗球虫指数、最适抗球虫活性百分率、病变记分减少率和相对卵囊产量4项指标,评价2个抗药株对地克珠利、癸氧喹酯、马杜拉霉素等3种抗球虫药物的抗药性,并以柔嫩艾美耳球虫敏感株为对照。结果显示,柔嫩艾美耳球虫敏感株对3种抗球虫药物均无抗药性,4项指标全部阴性。柔嫩艾美耳球虫马杜拉霉素抗药株对马杜拉霉素为完全耐药,4项指标全部阳性;对地克珠利、癸氧喹酯则表现为无抗药性,4项指标全部阴性。柔嫩艾美耳球虫地克珠利抗药株对地克珠利表现为完全耐药,4项指标全部阳性;对马杜拉霉素表现为中度耐药,2项指标阳性;对癸氧喹酯则表现为无抗药性,4项指标全部阴性。结果表明,在实验室已繁殖保存10余年的柔嫩艾美耳球虫2个抗药虫株对其诱导药物具有明显抗药性,实验室保种繁殖方法可行,虫株遗传稳定性良好,为利用该虫株进行球虫抗药性机制等相关研究奠定了基础。
2016年06期 v.24;No.114 50-55页 [查看摘要][在线阅读][下载 1014K] [阅读次数:275 ] |[下载次数:115 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:8 ] - 唐敏;韩红玉;董辉;门启斐;夏伟丽;朱顺海;赵其平;黄兵;
为系统了解我国野生鸟类寄生绦虫的种类与地理分布,作者查阅了记载我国野生鸟类绦虫的相关文献,按绦虫的分类系统和目、科、属、种的拉丁文字母顺序整理成文。共收录绦虫177种,隶属于绦虫纲的2目10科60属,依次列出了每种绦虫的中文名称、拉丁文名称、命名人与命名年、寄生宿主与部位、地理分布及文献来源等信息,为全面掌握我国野生鸟类寄生绦虫的种类与分布状况提供了基础资料。
2016年06期 v.24;No.114 56-74页 [查看摘要][在线阅读][下载 1094K] [阅读次数:112 ] |[下载次数:120 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ]