- 方谱县;张蕙畅;夏思进;江晓翠;孙倩倩;肖少波;方六荣;
为制备猪δ冠状病毒（PDCoV）N蛋白的特异性单克隆抗体，并初步应用于临床样品中PDCoV抗原的免疫组织化学（IHC）检测，本研究以原核表达的PDCo V N蛋白免疫BALB/c小鼠，取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合，基于纯化的N蛋白建立的间接ELISA方法筛选获得稳定分泌N蛋白特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞，并对单克隆抗体的免疫反应特异性、亚类进行系统鉴定。结果显示：通过3次亚克隆筛选获得8株可分泌PDCo V N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经IFA和Western blot分析，证实制备的单克隆抗体均与猪δ冠状病毒反应，且不与猪流行性腹泻病毒（PEDV）和猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）反应，特异性良好。单克隆抗体亚类鉴定结果表明，1A11、3C6、1E7、1E12株单克隆抗体属Ig G1型，4F3、2A3株单克隆抗体为Ig G2a型，3E4单克隆抗体为Ig M型，8株单克隆抗体的轻链均为κ链。利用1A11单克隆抗体对PDCo V、PDEV、TGEV感染猪的空肠、回肠组织进行IHC检测，结果表明1A11能与感染PDCo V的组织发生特异性免疫反应，而不与感染PDEV和TGEV的组织发生反应，特异性良好。本研究制备的PDCo V N蛋白单克隆抗体可为PDCo V诊断方法的建立以及N蛋白的功能研究奠定基础。
2023年06期 v.31;No.156 1-10页 [查看摘要][在线阅读][下载 1764K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：799 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] - 方谱县;张蕙畅;夏思进;江晓翠;孙倩倩;肖少波;方六荣;
为制备猪δ冠状病毒（PDCoV）N蛋白的特异性单克隆抗体，并初步应用于临床样品中PDCoV抗原的免疫组织化学（IHC）检测，本研究以原核表达的PDCo V N蛋白免疫BALB/c小鼠，取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合，基于纯化的N蛋白建立的间接ELISA方法筛选获得稳定分泌N蛋白特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞，并对单克隆抗体的免疫反应特异性、亚类进行系统鉴定。结果显示：通过3次亚克隆筛选获得8株可分泌PDCo V N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经IFA和Western blot分析，证实制备的单克隆抗体均与猪δ冠状病毒反应，且不与猪流行性腹泻病毒（PEDV）和猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）反应，特异性良好。单克隆抗体亚类鉴定结果表明，1A11、3C6、1E7、1E12株单克隆抗体属Ig G1型，4F3、2A3株单克隆抗体为Ig G2a型，3E4单克隆抗体为Ig M型，8株单克隆抗体的轻链均为κ链。利用1A11单克隆抗体对PDCo V、PDEV、TGEV感染猪的空肠、回肠组织进行IHC检测，结果表明1A11能与感染PDCo V的组织发生特异性免疫反应，而不与感染PDEV和TGEV的组织发生反应，特异性良好。本研究制备的PDCo V N蛋白单克隆抗体可为PDCo V诊断方法的建立以及N蛋白的功能研究奠定基础。
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为制备猪δ冠状病毒（PDCoV）N蛋白的特异性单克隆抗体，并初步应用于临床样品中PDCoV抗原的免疫组织化学（IHC）检测，本研究以原核表达的PDCo V N蛋白免疫BALB/c小鼠，取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合，基于纯化的N蛋白建立的间接ELISA方法筛选获得稳定分泌N蛋白特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞，并对单克隆抗体的免疫反应特异性、亚类进行系统鉴定。结果显示：通过3次亚克隆筛选获得8株可分泌PDCo V N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经IFA和Western blot分析，证实制备的单克隆抗体均与猪δ冠状病毒反应，且不与猪流行性腹泻病毒（PEDV）和猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）反应，特异性良好。单克隆抗体亚类鉴定结果表明，1A11、3C6、1E7、1E12株单克隆抗体属Ig G1型，4F3、2A3株单克隆抗体为Ig G2a型，3E4单克隆抗体为Ig M型，8株单克隆抗体的轻链均为κ链。利用1A11单克隆抗体对PDCo V、PDEV、TGEV感染猪的空肠、回肠组织进行IHC检测，结果表明1A11能与感染PDCo V的组织发生特异性免疫反应，而不与感染PDEV和TGEV的组织发生反应，特异性良好。本研究制备的PDCo V N蛋白单克隆抗体可为PDCo V诊断方法的建立以及N蛋白的功能研究奠定基础。
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为获得旋毛虫（T1）脱氧核糖核酸酶Ⅱ（DNase Ⅱ）蛋白，观察其在肌幼虫虫体中的分布，以旋毛虫（T1）肌幼虫cDNA为模板，利用RT-PCR技术扩增旋毛虫脱氧核糖核酸酶Ⅱ（TsDNase Ⅱ）蛋白的编码基因tsdnase Ⅱ，将其克隆到原核表达载体pCold-TF中，转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中，以IPTG诱导表达，表达产物进行SDS-PAGE电泳分析；利用酶联免疫吸附试验（ELISA）及Western blot分析重组Ts DNaseⅡ（rTsDNase Ⅱ）蛋白的反应原性；将rTsDNase Ⅱ蛋白免疫6-8周BALB/c小鼠，制备其多克隆抗体；制作旋毛虫肌幼虫冰冻切片，利用免疫荧光试验观察TsDNase Ⅱ蛋白在虫体中的分布。结果，成功地扩增出了长度为942 bp的旋毛虫tsdnase Ⅱ基因片段，构建了其原核表达质粒pCold-TF-tsdnase Ⅱ；转化了重组表达质粒的大肠杆菌BL21(DE3)成功可溶表达了rTsDNase Ⅱ，大小为86 kDa;ELISA与Western blot分析结果显示，rTsDNase Ⅱ蛋白能与感染旋毛虫的小鼠血清发生特异性反应；冰冻切片免疫荧光分析显示，TsDNase Ⅱ分布于旋毛虫肌幼虫整个虫体。研究结果为进一步分析TsDNase Ⅱ的特性与功能、利用该蛋白研发旋毛虫病新型防控策略打下了基础。
2023年06期 v.31;No.156 11-19页 [查看摘要][在线阅读][下载 1516K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：211 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] - 赵冰;阿曼古丽·斯拉依;米荣升;程龙;刘旗;龚海燕;张烨华;贾海燕;韩先干;黄燕;陈兆国;赵权;
为获得旋毛虫（T1）脱氧核糖核酸酶Ⅱ（DNase Ⅱ）蛋白，观察其在肌幼虫虫体中的分布，以旋毛虫（T1）肌幼虫cDNA为模板，利用RT-PCR技术扩增旋毛虫脱氧核糖核酸酶Ⅱ（TsDNase Ⅱ）蛋白的编码基因tsdnase Ⅱ，将其克隆到原核表达载体pCold-TF中，转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中，以IPTG诱导表达，表达产物进行SDS-PAGE电泳分析；利用酶联免疫吸附试验（ELISA）及Western blot分析重组Ts DNaseⅡ（rTsDNase Ⅱ）蛋白的反应原性；将rTsDNase Ⅱ蛋白免疫6-8周BALB/c小鼠，制备其多克隆抗体；制作旋毛虫肌幼虫冰冻切片，利用免疫荧光试验观察TsDNase Ⅱ蛋白在虫体中的分布。结果，成功地扩增出了长度为942 bp的旋毛虫tsdnase Ⅱ基因片段，构建了其原核表达质粒pCold-TF-tsdnase Ⅱ；转化了重组表达质粒的大肠杆菌BL21(DE3)成功可溶表达了rTsDNase Ⅱ，大小为86 kDa;ELISA与Western blot分析结果显示，rTsDNase Ⅱ蛋白能与感染旋毛虫的小鼠血清发生特异性反应；冰冻切片免疫荧光分析显示，TsDNase Ⅱ分布于旋毛虫肌幼虫整个虫体。研究结果为进一步分析TsDNase Ⅱ的特性与功能、利用该蛋白研发旋毛虫病新型防控策略打下了基础。
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为获得旋毛虫（T1）脱氧核糖核酸酶Ⅱ（DNase Ⅱ）蛋白，观察其在肌幼虫虫体中的分布，以旋毛虫（T1）肌幼虫cDNA为模板，利用RT-PCR技术扩增旋毛虫脱氧核糖核酸酶Ⅱ（TsDNase Ⅱ）蛋白的编码基因tsdnase Ⅱ，将其克隆到原核表达载体pCold-TF中，转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中，以IPTG诱导表达，表达产物进行SDS-PAGE电泳分析；利用酶联免疫吸附试验（ELISA）及Western blot分析重组Ts DNaseⅡ（rTsDNase Ⅱ）蛋白的反应原性；将rTsDNase Ⅱ蛋白免疫6-8周BALB/c小鼠，制备其多克隆抗体；制作旋毛虫肌幼虫冰冻切片，利用免疫荧光试验观察TsDNase Ⅱ蛋白在虫体中的分布。结果，成功地扩增出了长度为942 bp的旋毛虫tsdnase Ⅱ基因片段，构建了其原核表达质粒pCold-TF-tsdnase Ⅱ；转化了重组表达质粒的大肠杆菌BL21(DE3)成功可溶表达了rTsDNase Ⅱ，大小为86 kDa;ELISA与Western blot分析结果显示，rTsDNase Ⅱ蛋白能与感染旋毛虫的小鼠血清发生特异性反应；冰冻切片免疫荧光分析显示，TsDNase Ⅱ分布于旋毛虫肌幼虫整个虫体。研究结果为进一步分析TsDNase Ⅱ的特性与功能、利用该蛋白研发旋毛虫病新型防控策略打下了基础。
2023年06期 v.31;No.156 11-19页 [查看摘要][在线阅读][下载 1516K] [阅读次数：1 ] |[下载次数：211 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] - 刘晓涵;祁晶晶;胡增金;李浩然;宋翠萍;尚原冰;王少辉;田明星;李涛;丁铲;蔡玉梅;于圣青;
为制备滑液囊支原体NADH氧化酶（NOX）的单克隆抗体。将本实验室前期构建好的重组菌株E. coli BL21(p ET28a-NOX)，进行诱导表达，经过纯化后免疫BALB/c小鼠，取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合，经间接ELISA筛选结合有限稀释法克隆化，得到1株稳定分泌抗MSNOX抗体的杂交瘤细胞株，命名为2F4。单克隆抗体亚型鉴定结果显示，该单克隆抗体为Ig G2b亚类，间接ELISA测定单克隆抗体腹水效价为1∶2 048 000。经Western blot和悬浮免疫荧光试验鉴定，该株单克隆抗体与MS不同分离株均发生特异性反应，与其他禽致病菌不发生反应。通过染色体分析，该杂交瘤细胞株2F4有98±5条染色体，符合杂交瘤细胞染色体的数目，证实细胞融合成功。本研究成功制备NADH氧化酶单克隆抗体，为建立滑液囊支原体的检测方法及进一步研究NADH氧化酶在MS致病机制中的作用提供了重要的生物材料。
2023年06期 v.31;No.156 20-27页 [查看摘要][在线阅读][下载 1503K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：402 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] - 刘晓涵;祁晶晶;胡增金;李浩然;宋翠萍;尚原冰;王少辉;田明星;李涛;丁铲;蔡玉梅;于圣青;
为制备滑液囊支原体NADH氧化酶（NOX）的单克隆抗体。将本实验室前期构建好的重组菌株E. coli BL21(p ET28a-NOX)，进行诱导表达，经过纯化后免疫BALB/c小鼠，取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合，经间接ELISA筛选结合有限稀释法克隆化，得到1株稳定分泌抗MSNOX抗体的杂交瘤细胞株，命名为2F4。单克隆抗体亚型鉴定结果显示，该单克隆抗体为Ig G2b亚类，间接ELISA测定单克隆抗体腹水效价为1∶2 048 000。经Western blot和悬浮免疫荧光试验鉴定，该株单克隆抗体与MS不同分离株均发生特异性反应，与其他禽致病菌不发生反应。通过染色体分析，该杂交瘤细胞株2F4有98±5条染色体，符合杂交瘤细胞染色体的数目，证实细胞融合成功。本研究成功制备NADH氧化酶单克隆抗体，为建立滑液囊支原体的检测方法及进一步研究NADH氧化酶在MS致病机制中的作用提供了重要的生物材料。
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为制备滑液囊支原体NADH氧化酶（NOX）的单克隆抗体。将本实验室前期构建好的重组菌株E. coli BL21(p ET28a-NOX)，进行诱导表达，经过纯化后免疫BALB/c小鼠，取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合，经间接ELISA筛选结合有限稀释法克隆化，得到1株稳定分泌抗MSNOX抗体的杂交瘤细胞株，命名为2F4。单克隆抗体亚型鉴定结果显示，该单克隆抗体为Ig G2b亚类，间接ELISA测定单克隆抗体腹水效价为1∶2 048 000。经Western blot和悬浮免疫荧光试验鉴定，该株单克隆抗体与MS不同分离株均发生特异性反应，与其他禽致病菌不发生反应。通过染色体分析，该杂交瘤细胞株2F4有98±5条染色体，符合杂交瘤细胞染色体的数目，证实细胞融合成功。本研究成功制备NADH氧化酶单克隆抗体，为建立滑液囊支原体的检测方法及进一步研究NADH氧化酶在MS致病机制中的作用提供了重要的生物材料。
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本试验旨在分离奶牛乳房炎源链球菌裂解性噬菌体，并对其进行生物学特性测定及比对分析。以实验室保存的奶牛乳房炎源链球菌为宿主菌，从新疆石河子地区奶牛场粪便、污水及奶牛饮用水中分离纯化裂解性噬菌体。利用双层琼脂平板法测定其裂解能力、最佳MOI、一步生长曲线的变化、热稳定性、酸碱耐受性等，并对结果进行比对分析。本试验中分离纯化出了1株裂解性噬菌体。使用透射电子显微镜观察P27其头部长约76.2 nm，尾长约153.1 nm，为常见的肌尾噬菌体，将其命名为vB＿SMC＿P27（简称P27）。P27最佳MOI为10℃、60℃下50 min活性丧失；在pH4.0～12.0时，噬菌体P27活性未有明显下降；裂解量约为156 PFU/cell，潜伏期约为15 min，爆发期约为140 min。其对奶牛乳房炎源链球菌的裂解率为33.33%(6/18)。P27裂解效果较好，增殖迅速，在生产中具有防治奶牛乳房炎源耐药链球菌的潜力。
2023年06期 v.31;No.156 28-34页 [查看摘要][在线阅读][下载 1510K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：446 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] - 王辉翔;吴子文;林津如;梁晏;屈勇刚;易鹏;俞佳辉;梁成哲;
本试验旨在分离奶牛乳房炎源链球菌裂解性噬菌体，并对其进行生物学特性测定及比对分析。以实验室保存的奶牛乳房炎源链球菌为宿主菌，从新疆石河子地区奶牛场粪便、污水及奶牛饮用水中分离纯化裂解性噬菌体。利用双层琼脂平板法测定其裂解能力、最佳MOI、一步生长曲线的变化、热稳定性、酸碱耐受性等，并对结果进行比对分析。本试验中分离纯化出了1株裂解性噬菌体。使用透射电子显微镜观察P27其头部长约76.2 nm，尾长约153.1 nm，为常见的肌尾噬菌体，将其命名为vB＿SMC＿P27（简称P27）。P27最佳MOI为10℃、60℃下50 min活性丧失；在pH4.0～12.0时，噬菌体P27活性未有明显下降；裂解量约为156 PFU/cell，潜伏期约为15 min，爆发期约为140 min。其对奶牛乳房炎源链球菌的裂解率为33.33%(6/18)。P27裂解效果较好，增殖迅速，在生产中具有防治奶牛乳房炎源耐药链球菌的潜力。
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本试验旨在分离奶牛乳房炎源链球菌裂解性噬菌体，并对其进行生物学特性测定及比对分析。以实验室保存的奶牛乳房炎源链球菌为宿主菌，从新疆石河子地区奶牛场粪便、污水及奶牛饮用水中分离纯化裂解性噬菌体。利用双层琼脂平板法测定其裂解能力、最佳MOI、一步生长曲线的变化、热稳定性、酸碱耐受性等，并对结果进行比对分析。本试验中分离纯化出了1株裂解性噬菌体。使用透射电子显微镜观察P27其头部长约76.2 nm，尾长约153.1 nm，为常见的肌尾噬菌体，将其命名为vB＿SMC＿P27（简称P27）。P27最佳MOI为10℃、60℃下50 min活性丧失；在pH4.0～12.0时，噬菌体P27活性未有明显下降；裂解量约为156 PFU/cell，潜伏期约为15 min，爆发期约为140 min。其对奶牛乳房炎源链球菌的裂解率为33.33%(6/18)。P27裂解效果较好，增殖迅速，在生产中具有防治奶牛乳房炎源耐药链球菌的潜力。
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为了解北疆某规模化奶牛场临床型乳房炎源粪肠球菌的耐药与毒力情况，采集了47份临床型乳房炎乳样进行细菌分离，通过生化鉴定及16S rRNA对粪肠球菌进行鉴定，进行了药敏试验及33种耐药基因检测，了解其耐药情况；通过小鼠LD_(50)、病变观察及6种毒力基因检测，了解其致病性。分离鉴定出了1株粪肠球菌，命名为SL22；遗传进化树构建中，与粪肠球菌菌株MD48、MD60(GenBank登录号分别为MW5784.17.1、MW5784.16.1)同源性为92.00%；在哥伦比亚血平板上具有溶血现象，为α溶血；在耐药情况检测中，SL22对青霉素G、杆菌肽耐药，对万古霉素等药物敏感，含有4种耐药基因（qnrD、floR、aac(6')-lb-cr、int I 1）；在毒力测定中，SL22对小鼠的LD50约为1.6×10~9 CFU/只，死亡小鼠肝脏、小肠出血明显，且含有4种毒力基因（gelE、cylA、ace、efaA）。本试验为奶牛乳房粪肠球菌感染的防治提供了参考。
2023年06期 v.31;No.156 35-44页 [查看摘要][在线阅读][下载 1585K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：382 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] - 常军帅;党瑞莹;杨盛源;屈勇刚;梁晏;李娜;张小玉;
为了解北疆某规模化奶牛场临床型乳房炎源粪肠球菌的耐药与毒力情况，采集了47份临床型乳房炎乳样进行细菌分离，通过生化鉴定及16S rRNA对粪肠球菌进行鉴定，进行了药敏试验及33种耐药基因检测，了解其耐药情况；通过小鼠LD_(50)、病变观察及6种毒力基因检测，了解其致病性。分离鉴定出了1株粪肠球菌，命名为SL22；遗传进化树构建中，与粪肠球菌菌株MD48、MD60(GenBank登录号分别为MW5784.17.1、MW5784.16.1)同源性为92.00%；在哥伦比亚血平板上具有溶血现象，为α溶血；在耐药情况检测中，SL22对青霉素G、杆菌肽耐药，对万古霉素等药物敏感，含有4种耐药基因（qnrD、floR、aac(6')-lb-cr、int I 1）；在毒力测定中，SL22对小鼠的LD50约为1.6×10~9 CFU/只，死亡小鼠肝脏、小肠出血明显，且含有4种毒力基因（gelE、cylA、ace、efaA）。本试验为奶牛乳房粪肠球菌感染的防治提供了参考。
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为了解北疆某规模化奶牛场临床型乳房炎源粪肠球菌的耐药与毒力情况，采集了47份临床型乳房炎乳样进行细菌分离，通过生化鉴定及16S rRNA对粪肠球菌进行鉴定，进行了药敏试验及33种耐药基因检测，了解其耐药情况；通过小鼠LD_(50)、病变观察及6种毒力基因检测，了解其致病性。分离鉴定出了1株粪肠球菌，命名为SL22；遗传进化树构建中，与粪肠球菌菌株MD48、MD60(GenBank登录号分别为MW5784.17.1、MW5784.16.1)同源性为92.00%；在哥伦比亚血平板上具有溶血现象，为α溶血；在耐药情况检测中，SL22对青霉素G、杆菌肽耐药，对万古霉素等药物敏感，含有4种耐药基因（qnrD、floR、aac(6')-lb-cr、int I 1）；在毒力测定中，SL22对小鼠的LD50约为1.6×10~9 CFU/只，死亡小鼠肝脏、小肠出血明显，且含有4种毒力基因（gelE、cylA、ace、efaA）。本试验为奶牛乳房粪肠球菌感染的防治提供了参考。
2023年06期 v.31;No.156 35-44页 [查看摘要][在线阅读][下载 1585K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：382 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] - 李虹晔;李双双;石亮;张海玲;廉士珍;曹海旭;白雪;胡博;
为对吉林省地区犬瘟热病毒（CDV）流行发病情况调查，本研究从吉林省长春市、吉林市、四平市的养犬场、毛皮动物养殖场、宠物医院共收集12份经胶体金试纸条检测为CDV阳性的肺部样品，利用Vero/DogSLAM细胞进行病毒分离培养，并对分离的病毒经PCR鉴定、间接免疫荧光试验确定该病的致病病原，并对该病毒分型鉴定和H基因的遗传进化分析，并且选取1株犬源CDV病毒感染6只2～3月龄的幼犬进行动物回归试验，每天观察试验犬的临床症状、测量体温、采集眼鼻、肛拭子，拭子经PCR检测CDV的粪便排毒情况。结果显示，有1株犬源样品在Vero/DogSLAM细胞上盲传第4代出现明显的CPE，毒价达104.56 TCID50/mL，经PCR鉴定结果表明分离出1株犬源CDV，命名MHK-04；病毒的分型鉴定结果表明，分离的MHK-04为Asia-I型；对MHK-04毒株的H基因的同源性分析结果表明，MHK-04株为Asia-I型，与广东分离株GD1818株的同源性最高，与疫苗株（Onderstepoort和CDV3）差异较大，核苷酸同源率均为90.1%，氨基酸同源率分别为90.0%和90.1%；经SWISS-MODEL预测H蛋白三维立体模型结果表明，MHK-04株H蛋白氨基酸序列T193I突变位点，位于H蛋白的外部结构中β6S4位，是其起始位点，推测T193I点突变与H蛋白的构像改变及SLAM受体亲和力有关，有待进一步验证；动物回归试验结果显示，MHK-04毒株在感染幼犬后，幼犬出现犬瘟热发病症状，体温在第4 d升高到41.4℃，并出现排毒现象。本研究为了解吉林地区CDV的流行规律及疾病的诊断、防治提供参考。
2023年06期 v.31;No.156 45-52页 [查看摘要][在线阅读][下载 1563K] [阅读次数：6 ] |[下载次数：544 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] - 李虹晔;李双双;石亮;张海玲;廉士珍;曹海旭;白雪;胡博;
为对吉林省地区犬瘟热病毒（CDV）流行发病情况调查，本研究从吉林省长春市、吉林市、四平市的养犬场、毛皮动物养殖场、宠物医院共收集12份经胶体金试纸条检测为CDV阳性的肺部样品，利用Vero/DogSLAM细胞进行病毒分离培养，并对分离的病毒经PCR鉴定、间接免疫荧光试验确定该病的致病病原，并对该病毒分型鉴定和H基因的遗传进化分析，并且选取1株犬源CDV病毒感染6只2～3月龄的幼犬进行动物回归试验，每天观察试验犬的临床症状、测量体温、采集眼鼻、肛拭子，拭子经PCR检测CDV的粪便排毒情况。结果显示，有1株犬源样品在Vero/DogSLAM细胞上盲传第4代出现明显的CPE，毒价达104.56 TCID50/mL，经PCR鉴定结果表明分离出1株犬源CDV，命名MHK-04；病毒的分型鉴定结果表明，分离的MHK-04为Asia-I型；对MHK-04毒株的H基因的同源性分析结果表明，MHK-04株为Asia-I型，与广东分离株GD1818株的同源性最高，与疫苗株（Onderstepoort和CDV3）差异较大，核苷酸同源率均为90.1%，氨基酸同源率分别为90.0%和90.1%；经SWISS-MODEL预测H蛋白三维立体模型结果表明，MHK-04株H蛋白氨基酸序列T193I突变位点，位于H蛋白的外部结构中β6S4位，是其起始位点，推测T193I点突变与H蛋白的构像改变及SLAM受体亲和力有关，有待进一步验证；动物回归试验结果显示，MHK-04毒株在感染幼犬后，幼犬出现犬瘟热发病症状，体温在第4 d升高到41.4℃，并出现排毒现象。本研究为了解吉林地区CDV的流行规律及疾病的诊断、防治提供参考。
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为对吉林省地区犬瘟热病毒（CDV）流行发病情况调查，本研究从吉林省长春市、吉林市、四平市的养犬场、毛皮动物养殖场、宠物医院共收集12份经胶体金试纸条检测为CDV阳性的肺部样品，利用Vero/DogSLAM细胞进行病毒分离培养，并对分离的病毒经PCR鉴定、间接免疫荧光试验确定该病的致病病原，并对该病毒分型鉴定和H基因的遗传进化分析，并且选取1株犬源CDV病毒感染6只2～3月龄的幼犬进行动物回归试验，每天观察试验犬的临床症状、测量体温、采集眼鼻、肛拭子，拭子经PCR检测CDV的粪便排毒情况。结果显示，有1株犬源样品在Vero/DogSLAM细胞上盲传第4代出现明显的CPE，毒价达104.56 TCID50/mL，经PCR鉴定结果表明分离出1株犬源CDV，命名MHK-04；病毒的分型鉴定结果表明，分离的MHK-04为Asia-I型；对MHK-04毒株的H基因的同源性分析结果表明，MHK-04株为Asia-I型，与广东分离株GD1818株的同源性最高，与疫苗株（Onderstepoort和CDV3）差异较大，核苷酸同源率均为90.1%，氨基酸同源率分别为90.0%和90.1%；经SWISS-MODEL预测H蛋白三维立体模型结果表明，MHK-04株H蛋白氨基酸序列T193I突变位点，位于H蛋白的外部结构中β6S4位，是其起始位点，推测T193I点突变与H蛋白的构像改变及SLAM受体亲和力有关，有待进一步验证；动物回归试验结果显示，MHK-04毒株在感染幼犬后，幼犬出现犬瘟热发病症状，体温在第4 d升高到41.4℃，并出现排毒现象。本研究为了解吉林地区CDV的流行规律及疾病的诊断、防治提供参考。
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为将噬菌体应用于防控与治疗鸡源粪肠球菌感染提供依据，本研究从养殖场污水中分离鸡源粪肠球菌噬菌体，利用双层平板培养法纯化分离噬菌体，10倍倍比稀释噬菌体滤液，观察噬斑测定其效价和最佳感染复数，绘制其一步生长曲线，点斑法测定其宿主谱；检测温度、紫外线照射、pH等对噬菌体活性影响；负染法透射电镜观察噬菌体形态。结果显示，从污水中分离出3株（EFC1、EFC2、EFC3）裂解粪肠球菌噬菌体，效价分别为6×10~8、6×10~9、2×10~(10) PFU/mL，最佳MOI分别为1、0.01、0.001，噬菌体感染潜伏期为80～120 min，暴发期为10～20 min，裂解量为3～71 PFU。3株噬菌体能裂解多株鸡源粪肠球菌，热稳定性较好，不耐受高于50℃的环境温度，对紫外线敏感，适应pH宽（4～12）；电镜观察噬菌体为蝌蚪形，属于有尾噬菌体目长尾噬菌体科。噬菌体对鸡源粪肠球菌的生长均具有一定抑杀作用，有望成为防控耐药粪肠球菌的抗生素替代产品。
2023年06期 v.31;No.156 53-60页 [查看摘要][在线阅读][下载 1531K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：524 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] - 王琦;刘彦威;刘娜;刘利强;崔国林;邓云贵;刘东海;李想;
为将噬菌体应用于防控与治疗鸡源粪肠球菌感染提供依据，本研究从养殖场污水中分离鸡源粪肠球菌噬菌体，利用双层平板培养法纯化分离噬菌体，10倍倍比稀释噬菌体滤液，观察噬斑测定其效价和最佳感染复数，绘制其一步生长曲线，点斑法测定其宿主谱；检测温度、紫外线照射、pH等对噬菌体活性影响；负染法透射电镜观察噬菌体形态。结果显示，从污水中分离出3株（EFC1、EFC2、EFC3）裂解粪肠球菌噬菌体，效价分别为6×10~8、6×10~9、2×10~(10) PFU/mL，最佳MOI分别为1、0.01、0.001，噬菌体感染潜伏期为80～120 min，暴发期为10～20 min，裂解量为3～71 PFU。3株噬菌体能裂解多株鸡源粪肠球菌，热稳定性较好，不耐受高于50℃的环境温度，对紫外线敏感，适应pH宽（4～12）；电镜观察噬菌体为蝌蚪形，属于有尾噬菌体目长尾噬菌体科。噬菌体对鸡源粪肠球菌的生长均具有一定抑杀作用，有望成为防控耐药粪肠球菌的抗生素替代产品。
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为将噬菌体应用于防控与治疗鸡源粪肠球菌感染提供依据，本研究从养殖场污水中分离鸡源粪肠球菌噬菌体，利用双层平板培养法纯化分离噬菌体，10倍倍比稀释噬菌体滤液，观察噬斑测定其效价和最佳感染复数，绘制其一步生长曲线，点斑法测定其宿主谱；检测温度、紫外线照射、pH等对噬菌体活性影响；负染法透射电镜观察噬菌体形态。结果显示，从污水中分离出3株（EFC1、EFC2、EFC3）裂解粪肠球菌噬菌体，效价分别为6×10~8、6×10~9、2×10~(10) PFU/mL，最佳MOI分别为1、0.01、0.001，噬菌体感染潜伏期为80～120 min，暴发期为10～20 min，裂解量为3～71 PFU。3株噬菌体能裂解多株鸡源粪肠球菌，热稳定性较好，不耐受高于50℃的环境温度，对紫外线敏感，适应pH宽（4～12）；电镜观察噬菌体为蝌蚪形，属于有尾噬菌体目长尾噬菌体科。噬菌体对鸡源粪肠球菌的生长均具有一定抑杀作用，有望成为防控耐药粪肠球菌的抗生素替代产品。
2023年06期 v.31;No.156 53-60页 [查看摘要][在线阅读][下载 1531K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：524 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] - 秦枫;刘云;吴植;王安平;吴双;董洪燕;朱善元;张乐;时菲菲;
本试验旨在研究中药复方M3对感染Ⅰ型鸭肝炎病毒（DHAV-1）雏鸭的体内治疗效果。选取60只雏鸭，随机分为6组，每组10只。试验组分别为空白组（Blank）、病毒组（Virus）、清瘟解毒口服液组（QW）、中药复方高剂量组（M3_H）、中剂量组（M3_M）和低剂量组（M3_L）。给药组在2日龄开始饮水给药，连续给药至实验结束，共11 d。除空白组外，在给药第4 d时进行攻毒，0.5 mL/只。比较各试验组雏鸭的病死率；对病死鸭和各组存活鸭进行解剖，观察肝脏和小肠的病理剖检及HE染色切片；分析雏鸭血液中DHAV-1 VP1基因拷贝数；检测分析血清过氧化指标（GSH-Px、MDA、SOD、CAT、iNOS）及生化指标（ALT、AST、TP、ALB、TBIL、DBIL、CHE、LDH、GGT），评价中药复方对感染鸭肝炎雏鸭的治疗效果。结果显示，中药复方M3中、高剂量组能够有效降低雏鸭死亡率；与病毒组相比，经过中药复方M3治疗后，能够显著降低雏鸭血液中DHAV-1 VP1基因拷贝数（P<0.05），感染雏鸭的肝损伤和氧化应激反应均减轻，且显著降低了感染雏鸭的ALT、LDH的含量（P<0.05）。以上结果表明，中药复方M3中、高剂量对鸭肝炎具有一定的防治效果，且中药复方M3中剂量更具有继续开发研究的可能。
2023年06期 v.31;No.156 61-71页 [查看摘要][在线阅读][下载 1715K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：301 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] - 秦枫;刘云;吴植;王安平;吴双;董洪燕;朱善元;张乐;时菲菲;
本试验旨在研究中药复方M3对感染Ⅰ型鸭肝炎病毒（DHAV-1）雏鸭的体内治疗效果。选取60只雏鸭，随机分为6组，每组10只。试验组分别为空白组（Blank）、病毒组（Virus）、清瘟解毒口服液组（QW）、中药复方高剂量组（M3_H）、中剂量组（M3_M）和低剂量组（M3_L）。给药组在2日龄开始饮水给药，连续给药至实验结束，共11 d。除空白组外，在给药第4 d时进行攻毒，0.5 mL/只。比较各试验组雏鸭的病死率；对病死鸭和各组存活鸭进行解剖，观察肝脏和小肠的病理剖检及HE染色切片；分析雏鸭血液中DHAV-1 VP1基因拷贝数；检测分析血清过氧化指标（GSH-Px、MDA、SOD、CAT、iNOS）及生化指标（ALT、AST、TP、ALB、TBIL、DBIL、CHE、LDH、GGT），评价中药复方对感染鸭肝炎雏鸭的治疗效果。结果显示，中药复方M3中、高剂量组能够有效降低雏鸭死亡率；与病毒组相比，经过中药复方M3治疗后，能够显著降低雏鸭血液中DHAV-1 VP1基因拷贝数（P<0.05），感染雏鸭的肝损伤和氧化应激反应均减轻，且显著降低了感染雏鸭的ALT、LDH的含量（P<0.05）。以上结果表明，中药复方M3中、高剂量对鸭肝炎具有一定的防治效果，且中药复方M3中剂量更具有继续开发研究的可能。
2023年06期 v.31;No.156 61-71页 [查看摘要][在线阅读][下载 1715K] [阅读次数：1 ] |[下载次数：301 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] - 秦枫;刘云;吴植;王安平;吴双;董洪燕;朱善元;张乐;时菲菲;
本试验旨在研究中药复方M3对感染Ⅰ型鸭肝炎病毒（DHAV-1）雏鸭的体内治疗效果。选取60只雏鸭，随机分为6组，每组10只。试验组分别为空白组（Blank）、病毒组（Virus）、清瘟解毒口服液组（QW）、中药复方高剂量组（M3_H）、中剂量组（M3_M）和低剂量组（M3_L）。给药组在2日龄开始饮水给药，连续给药至实验结束，共11 d。除空白组外，在给药第4 d时进行攻毒，0.5 mL/只。比较各试验组雏鸭的病死率；对病死鸭和各组存活鸭进行解剖，观察肝脏和小肠的病理剖检及HE染色切片；分析雏鸭血液中DHAV-1 VP1基因拷贝数；检测分析血清过氧化指标（GSH-Px、MDA、SOD、CAT、iNOS）及生化指标（ALT、AST、TP、ALB、TBIL、DBIL、CHE、LDH、GGT），评价中药复方对感染鸭肝炎雏鸭的治疗效果。结果显示，中药复方M3中、高剂量组能够有效降低雏鸭死亡率；与病毒组相比，经过中药复方M3治疗后，能够显著降低雏鸭血液中DHAV-1 VP1基因拷贝数（P<0.05），感染雏鸭的肝损伤和氧化应激反应均减轻，且显著降低了感染雏鸭的ALT、LDH的含量（P<0.05）。以上结果表明，中药复方M3中、高剂量对鸭肝炎具有一定的防治效果，且中药复方M3中剂量更具有继续开发研究的可能。
2023年06期 v.31;No.156 61-71页 [查看摘要][在线阅读][下载 1715K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：301 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] - 朱小甫;吴旭锦;
建立一种基于猪德尔塔冠状病毒（PDCo V)N基因的RT-n PCR检测方法，对陕西省猪群PDCo V感染情况进行流行病学调查，分析PDCo V流行毒株N基因变异情况。通过病毒分离、检测引物设计、反应体系与条件优化、灵敏性试验和特异性试验，建立了PDCo V RT-nPCR检测方法，并对N基因片段进行序列分析。结果表明：建立的RT-n PCR方法能够扩增出303 bp的N基因目的片段，检测单链c DNA的极限为2.0194×10~(-3) ng·μL~(-1)，该方法检测PEDV、TGEV、PRo V、CSFV与PRRSV均无交叉反应，特异性良好；陕西省猪场184份样品检测结果显示，PDCo V阳性率为6.52%(12/184);N基因序列分析发现，获得的HY2019、QLS2020的N基因片段同源性为99.0%，提示可能为同一来源；进化树分析发现，HY2019、QLS2020与我国四川株SCNC201705、Sichuan2017、Sichuan2019同处于一个小的进化分支上，且均存在168～179位“TGTCTGTCTCTA”共12个核苷酸缺失，推测陕西株与四川株高度同源，可能起源于早期四川毒株。
2023年06期 v.31;No.156 72-77页 [查看摘要][在线阅读][下载 1610K] [阅读次数：1 ] |[下载次数：385 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] - 朱小甫;吴旭锦;
建立一种基于猪德尔塔冠状病毒（PDCo V)N基因的RT-n PCR检测方法，对陕西省猪群PDCo V感染情况进行流行病学调查，分析PDCo V流行毒株N基因变异情况。通过病毒分离、检测引物设计、反应体系与条件优化、灵敏性试验和特异性试验，建立了PDCo V RT-nPCR检测方法，并对N基因片段进行序列分析。结果表明：建立的RT-n PCR方法能够扩增出303 bp的N基因目的片段，检测单链c DNA的极限为2.0194×10~(-3) ng·μL~(-1)，该方法检测PEDV、TGEV、PRo V、CSFV与PRRSV均无交叉反应，特异性良好；陕西省猪场184份样品检测结果显示，PDCo V阳性率为6.52%(12/184);N基因序列分析发现，获得的HY2019、QLS2020的N基因片段同源性为99.0%，提示可能为同一来源；进化树分析发现，HY2019、QLS2020与我国四川株SCNC201705、Sichuan2017、Sichuan2019同处于一个小的进化分支上，且均存在168～179位“TGTCTGTCTCTA”共12个核苷酸缺失，推测陕西株与四川株高度同源，可能起源于早期四川毒株。
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建立一种基于猪德尔塔冠状病毒（PDCo V)N基因的RT-n PCR检测方法，对陕西省猪群PDCo V感染情况进行流行病学调查，分析PDCo V流行毒株N基因变异情况。通过病毒分离、检测引物设计、反应体系与条件优化、灵敏性试验和特异性试验，建立了PDCo V RT-nPCR检测方法，并对N基因片段进行序列分析。结果表明：建立的RT-n PCR方法能够扩增出303 bp的N基因目的片段，检测单链c DNA的极限为2.0194×10~(-3) ng·μL~(-1)，该方法检测PEDV、TGEV、PRo V、CSFV与PRRSV均无交叉反应，特异性良好；陕西省猪场184份样品检测结果显示，PDCo V阳性率为6.52%(12/184);N基因序列分析发现，获得的HY2019、QLS2020的N基因片段同源性为99.0%，提示可能为同一来源；进化树分析发现，HY2019、QLS2020与我国四川株SCNC201705、Sichuan2017、Sichuan2019同处于一个小的进化分支上，且均存在168～179位“TGTCTGTCTCTA”共12个核苷酸缺失，推测陕西株与四川株高度同源，可能起源于早期四川毒株。
2023年06期 v.31;No.156 72-77页 [查看摘要][在线阅读][下载 1610K] [阅读次数：1 ] |[下载次数：385 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] - 薛俊欣;韩伟;朱忠武;熊炜;黄忠荣;李春阳;赵新宇;孔祥翔;李健;蒋原;
灵敏、准确、多样的检测方法对有效防控猪瘟疫情极其重要，为了丰富现有的猪瘟病毒（CSFV）检测技术，本研究拟建立基于RAA-Cas13a的检测方法。基于全序列比对的基础上分别设计1对引物和两条cr RNA，对不同浓度的阳性质粒、阳性样品和7种其他猪病病毒样品进行RAA扩增，扩增产物以Cas13a酶切体系进行荧光检测；结果显示，Cas13a酶切体系可以放大普通RAA的检测信号，RAA-Cas13a可以将检测的灵敏度提高至10~2 copies/μL，不能检出其他7种猪病病毒，检测变异系数小于5%，临床样本检测结果与荧光RT-PCR一致性高。结果表明，本研究建立CSFV的RAA-Cas13a灵敏度较高、特异性和重复性好，具有推广应用的潜力。
2023年06期 v.31;No.156 78-84页 [查看摘要][在线阅读][下载 1472K] [阅读次数：1 ] |[下载次数：791 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] - 薛俊欣;韩伟;朱忠武;熊炜;黄忠荣;李春阳;赵新宇;孔祥翔;李健;蒋原;
灵敏、准确、多样的检测方法对有效防控猪瘟疫情极其重要，为了丰富现有的猪瘟病毒（CSFV）检测技术，本研究拟建立基于RAA-Cas13a的检测方法。基于全序列比对的基础上分别设计1对引物和两条cr RNA，对不同浓度的阳性质粒、阳性样品和7种其他猪病病毒样品进行RAA扩增，扩增产物以Cas13a酶切体系进行荧光检测；结果显示，Cas13a酶切体系可以放大普通RAA的检测信号，RAA-Cas13a可以将检测的灵敏度提高至10~2 copies/μL，不能检出其他7种猪病病毒，检测变异系数小于5%，临床样本检测结果与荧光RT-PCR一致性高。结果表明，本研究建立CSFV的RAA-Cas13a灵敏度较高、特异性和重复性好，具有推广应用的潜力。
2023年06期 v.31;No.156 78-84页 [查看摘要][在线阅读][下载 1472K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：791 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] - 薛俊欣;韩伟;朱忠武;熊炜;黄忠荣;李春阳;赵新宇;孔祥翔;李健;蒋原;
灵敏、准确、多样的检测方法对有效防控猪瘟疫情极其重要，为了丰富现有的猪瘟病毒（CSFV）检测技术，本研究拟建立基于RAA-Cas13a的检测方法。基于全序列比对的基础上分别设计1对引物和两条cr RNA，对不同浓度的阳性质粒、阳性样品和7种其他猪病病毒样品进行RAA扩增，扩增产物以Cas13a酶切体系进行荧光检测；结果显示，Cas13a酶切体系可以放大普通RAA的检测信号，RAA-Cas13a可以将检测的灵敏度提高至10~2 copies/μL，不能检出其他7种猪病病毒，检测变异系数小于5%，临床样本检测结果与荧光RT-PCR一致性高。结果表明，本研究建立CSFV的RAA-Cas13a灵敏度较高、特异性和重复性好，具有推广应用的潜力。
2023年06期 v.31;No.156 78-84页 [查看摘要][在线阅读][下载 1472K] [阅读次数：1 ] |[下载次数：791 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] - 田瑶;时建立;彭喆;李琛;徐绍建;吴晓燕;李佳昕;杨莹;王硕;刘畅;韩红;李俊;韩先杰;
猪圆环病毒（PCV）包括猪圆环病毒1型（PCV1）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪圆环病毒3型（PCV3）。近些年来，PCV1、PCV2、PCV3基因型之间存在共感染，因此建立一种快捷、特异、敏感的PCV1、PCV2、PCV3的SYBR GreenΙ实时荧光定量PCR鉴别检测方法显得尤为必要。本试验通过特异性引物筛选，各项反应条件优化，建立了实时荧光定量PCR鉴别方法。结果表明：PCV1、PCV2、PCV3检测下限分别为40.3、25.2、22.4 copies/μL。与猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪细小病毒（PPV）均无交叉反应。批内及批间变异系数均小于1%。对98份PCV疑似阳性病料检测结果表明，PCV1、PCV2、PCV3感染率分别为10.2%、65.3%、53.1%，共感染率为7.1%。该方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性，为PCV1、PCV2、PCV3的早期检测、定量检测及后期研究提供了技术手段。
2023年06期 v.31;No.156 85-93页 [查看摘要][在线阅读][下载 1591K] [阅读次数：1 ] |[下载次数：799 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：8 ] - 田瑶;时建立;彭喆;李琛;徐绍建;吴晓燕;李佳昕;杨莹;王硕;刘畅;韩红;李俊;韩先杰;
猪圆环病毒（PCV）包括猪圆环病毒1型（PCV1）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪圆环病毒3型（PCV3）。近些年来，PCV1、PCV2、PCV3基因型之间存在共感染，因此建立一种快捷、特异、敏感的PCV1、PCV2、PCV3的SYBR GreenΙ实时荧光定量PCR鉴别检测方法显得尤为必要。本试验通过特异性引物筛选，各项反应条件优化，建立了实时荧光定量PCR鉴别方法。结果表明：PCV1、PCV2、PCV3检测下限分别为40.3、25.2、22.4 copies/μL。与猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪细小病毒（PPV）均无交叉反应。批内及批间变异系数均小于1%。对98份PCV疑似阳性病料检测结果表明，PCV1、PCV2、PCV3感染率分别为10.2%、65.3%、53.1%，共感染率为7.1%。该方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性，为PCV1、PCV2、PCV3的早期检测、定量检测及后期研究提供了技术手段。
2023年06期 v.31;No.156 85-93页 [查看摘要][在线阅读][下载 1591K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：799 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：8 ] - 田瑶;时建立;彭喆;李琛;徐绍建;吴晓燕;李佳昕;杨莹;王硕;刘畅;韩红;李俊;韩先杰;
猪圆环病毒（PCV）包括猪圆环病毒1型（PCV1）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪圆环病毒3型（PCV3）。近些年来，PCV1、PCV2、PCV3基因型之间存在共感染，因此建立一种快捷、特异、敏感的PCV1、PCV2、PCV3的SYBR GreenΙ实时荧光定量PCR鉴别检测方法显得尤为必要。本试验通过特异性引物筛选，各项反应条件优化，建立了实时荧光定量PCR鉴别方法。结果表明：PCV1、PCV2、PCV3检测下限分别为40.3、25.2、22.4 copies/μL。与猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪细小病毒（PPV）均无交叉反应。批内及批间变异系数均小于1%。对98份PCV疑似阳性病料检测结果表明，PCV1、PCV2、PCV3感染率分别为10.2%、65.3%、53.1%，共感染率为7.1%。该方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性，为PCV1、PCV2、PCV3的早期检测、定量检测及后期研究提供了技术手段。
2023年06期 v.31;No.156 85-93页 [查看摘要][在线阅读][下载 1591K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：799 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：8 ] - 胡冉冉;赵云环;刘莹;张帅;郭禹;左玉柱;范京惠;
为建立一种快速、便捷的检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗体的胶体金免疫层析方法，本试验通过原核表达截短的M基因作为检测线，葡萄球菌A蛋白（SPA）和鸡抗SPA作为金标抗原和质控线。结果显示，该试纸条与猪伪狂犬病毒（PRV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪流行性腹泻病毒（PEDV）和猪圆环病毒2型（PCV2），均不存在交叉反应，特异性强；最低检测限度为1∶6400，灵敏性高；批间、批内无差异性；4℃可保存30 d，稳定性好；临床样品检测结果与爱德士试剂盒符合率达到94.82%。综上所述，本试验建立了一种敏感性高、特异性好的PRRSV抗体检测的免疫层析试纸条，为PRRSV的监测、预防及诊断提供了技术支持。
2023年06期 v.31;No.156 94-100页 [查看摘要][在线阅读][下载 1481K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：419 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] - 胡冉冉;赵云环;刘莹;张帅;郭禹;左玉柱;范京惠;
为建立一种快速、便捷的检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗体的胶体金免疫层析方法，本试验通过原核表达截短的M基因作为检测线，葡萄球菌A蛋白（SPA）和鸡抗SPA作为金标抗原和质控线。结果显示，该试纸条与猪伪狂犬病毒（PRV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪流行性腹泻病毒（PEDV）和猪圆环病毒2型（PCV2），均不存在交叉反应，特异性强；最低检测限度为1∶6400，灵敏性高；批间、批内无差异性；4℃可保存30 d，稳定性好；临床样品检测结果与爱德士试剂盒符合率达到94.82%。综上所述，本试验建立了一种敏感性高、特异性好的PRRSV抗体检测的免疫层析试纸条，为PRRSV的监测、预防及诊断提供了技术支持。
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为建立一种快速、便捷的检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗体的胶体金免疫层析方法，本试验通过原核表达截短的M基因作为检测线，葡萄球菌A蛋白（SPA）和鸡抗SPA作为金标抗原和质控线。结果显示，该试纸条与猪伪狂犬病毒（PRV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪流行性腹泻病毒（PEDV）和猪圆环病毒2型（PCV2），均不存在交叉反应，特异性强；最低检测限度为1∶6400，灵敏性高；批间、批内无差异性；4℃可保存30 d，稳定性好；临床样品检测结果与爱德士试剂盒符合率达到94.82%。综上所述，本试验建立了一种敏感性高、特异性好的PRRSV抗体检测的免疫层析试纸条，为PRRSV的监测、预防及诊断提供了技术支持。
2023年06期 v.31;No.156 94-100页 [查看摘要][在线阅读][下载 1481K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：419 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] - 姚雨欣;杨世兴;沈权;王晓春;张文;
野鸟作为多种致病性病毒的天然宿主，可通过迁徙活动广泛传播病毒，给人类和其他动物的生命安全带来了严峻挑战。本研究中，我们从青海湿地公园的野生大雁泄殖腔拭子中鉴定出13个新型CRESS-DNA病毒全基因组。此外，基于Rep蛋白的系统发育分析表明，这13株新型CRESS-DNA病毒被划分为CRESS-DNA病毒家族的两个不同进化枝，其中1株隶属于未分类的CRESS-DNA病毒簇的分支，而其余12株则全部归类为类双生病毒科（Genomoviridae）。本研究在野生大雁体内发现13个新型CRESS-DNA病毒，将有助于我们对于CRESS-DNA病毒的多样性以及进化起源的研究。
2023年06期 v.31;No.156 101-107页 [查看摘要][在线阅读][下载 1506K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：208 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] - 姚雨欣;杨世兴;沈权;王晓春;张文;
野鸟作为多种致病性病毒的天然宿主，可通过迁徙活动广泛传播病毒，给人类和其他动物的生命安全带来了严峻挑战。本研究中，我们从青海湿地公园的野生大雁泄殖腔拭子中鉴定出13个新型CRESS-DNA病毒全基因组。此外，基于Rep蛋白的系统发育分析表明，这13株新型CRESS-DNA病毒被划分为CRESS-DNA病毒家族的两个不同进化枝，其中1株隶属于未分类的CRESS-DNA病毒簇的分支，而其余12株则全部归类为类双生病毒科（Genomoviridae）。本研究在野生大雁体内发现13个新型CRESS-DNA病毒，将有助于我们对于CRESS-DNA病毒的多样性以及进化起源的研究。
2023年06期 v.31;No.156 101-107页 [查看摘要][在线阅读][下载 1506K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：208 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] - 姚雨欣;杨世兴;沈权;王晓春;张文;
野鸟作为多种致病性病毒的天然宿主，可通过迁徙活动广泛传播病毒，给人类和其他动物的生命安全带来了严峻挑战。本研究中，我们从青海湿地公园的野生大雁泄殖腔拭子中鉴定出13个新型CRESS-DNA病毒全基因组。此外，基于Rep蛋白的系统发育分析表明，这13株新型CRESS-DNA病毒被划分为CRESS-DNA病毒家族的两个不同进化枝，其中1株隶属于未分类的CRESS-DNA病毒簇的分支，而其余12株则全部归类为类双生病毒科（Genomoviridae）。本研究在野生大雁体内发现13个新型CRESS-DNA病毒，将有助于我们对于CRESS-DNA病毒的多样性以及进化起源的研究。
2023年06期 v.31;No.156 101-107页 [查看摘要][在线阅读][下载 1506K] [阅读次数：1 ] |[下载次数：208 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] - 张淼;吕炫;毕庄莉;朱英奇;张冲;李佳明;张瑞辰;吴琼;王桂军;
为了解猫传染性腹膜炎病毒（FIPV）的基因组特征和遗传变异情况。本试验利用RT-PCR方法从患病猫组织中鉴定出1株Ⅰ型FIPV病毒，通过RT-PCR扩增18个片段的目的基因，连接到p CE-TA克隆载体后测序，对测序结果进行拼接获得FIPV NJ-20-a株的全基因序列，对获得的全基因序列和编码区序列以往毒株进行同源性分析，并构建S基因系统进化树。结果显示NJ-20-a株与以往毒株同源性较低，新分离毒株基因组变异较大，通过编码区序列同源性分析发现S基因和3a、3b、3c基因是变异的主要区域，S基因系统进化树发现NJ-20-a株处于Ⅰ型FIPV分支内的单独分支，与以往毒株进化差异较大，表明猫冠状病毒在不同地域遗传进化过程中差异较大。本研究通过对FIPV NJ-20-a毒株进行全基因测序和分析，为猫冠状病毒的分子生物学研究和流行性学的调查提供了一定基础。
2023年06期 v.31;No.156 108-115页 [查看摘要][在线阅读][下载 1620K] [阅读次数：3 ] |[下载次数：1263 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] - 张淼;吕炫;毕庄莉;朱英奇;张冲;李佳明;张瑞辰;吴琼;王桂军;
为了解猫传染性腹膜炎病毒（FIPV）的基因组特征和遗传变异情况。本试验利用RT-PCR方法从患病猫组织中鉴定出1株Ⅰ型FIPV病毒，通过RT-PCR扩增18个片段的目的基因，连接到p CE-TA克隆载体后测序，对测序结果进行拼接获得FIPV NJ-20-a株的全基因序列，对获得的全基因序列和编码区序列以往毒株进行同源性分析，并构建S基因系统进化树。结果显示NJ-20-a株与以往毒株同源性较低，新分离毒株基因组变异较大，通过编码区序列同源性分析发现S基因和3a、3b、3c基因是变异的主要区域，S基因系统进化树发现NJ-20-a株处于Ⅰ型FIPV分支内的单独分支，与以往毒株进化差异较大，表明猫冠状病毒在不同地域遗传进化过程中差异较大。本研究通过对FIPV NJ-20-a毒株进行全基因测序和分析，为猫冠状病毒的分子生物学研究和流行性学的调查提供了一定基础。
2023年06期 v.31;No.156 108-115页 [查看摘要][在线阅读][下载 1620K] [阅读次数：1 ] |[下载次数：1263 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] - 张淼;吕炫;毕庄莉;朱英奇;张冲;李佳明;张瑞辰;吴琼;王桂军;
为了解猫传染性腹膜炎病毒（FIPV）的基因组特征和遗传变异情况。本试验利用RT-PCR方法从患病猫组织中鉴定出1株Ⅰ型FIPV病毒，通过RT-PCR扩增18个片段的目的基因，连接到p CE-TA克隆载体后测序，对测序结果进行拼接获得FIPV NJ-20-a株的全基因序列，对获得的全基因序列和编码区序列以往毒株进行同源性分析，并构建S基因系统进化树。结果显示NJ-20-a株与以往毒株同源性较低，新分离毒株基因组变异较大，通过编码区序列同源性分析发现S基因和3a、3b、3c基因是变异的主要区域，S基因系统进化树发现NJ-20-a株处于Ⅰ型FIPV分支内的单独分支，与以往毒株进化差异较大，表明猫冠状病毒在不同地域遗传进化过程中差异较大。本研究通过对FIPV NJ-20-a毒株进行全基因测序和分析，为猫冠状病毒的分子生物学研究和流行性学的调查提供了一定基础。
2023年06期 v.31;No.156 108-115页 [查看摘要][在线阅读][下载 1620K] [阅读次数：1 ] |[下载次数：1263 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] - 游广炬;阿热阿依·海依拉提;李炜;李晓齐;高丽;曹红;王永强;郑世军;
为研究目前中国临床流行的ALV毒株特征，我们采集临床上ALV P27阳性的鸡的血浆，接种DF-1细胞进行病毒分离，分离出6株外源性ALV毒株，并进一步对分离毒株进行前病毒全基因组测序。结果表明，6个ALV分离株的基因组结构均为典型的复制完整型C型逆转录病毒，缺乏病毒致癌基因，分离株DT190901基因组全长为7473 bp;DT190902和DT190905为7467 bp;DT190903和DT190906为7481 bp;DT190904为7493 bp，分离株间基因组序列同源性较高（98.6%～99.9%）。对6个ALV分离株与其他ALV毒株进行序列比较和遗传进化分析，结果表明，分离株的LTR、gag、pol及gp37基因与内源性ALV相比具有较高同源性（>93.8%）,gp85基因与ALV-K一致性较高（>95.4%），属于新型ALV亚群（K亚群）遗传分支。分离株的LTR序列与内源性ALV相似，比其他外源性ALV亚群缺少一个CAAT Box、PRE Box、Y Box及CArG Box等转录调控元件。结果表明这6个分离株属于ALV-K亚群，为ALV-K与内源性ALV的重组毒株，其LTR序列与内源性ALV接近可能导致其复制能力及致病性降低。遗传进化分析表明，ALV-K已经在我国局部流行，并出现基因重组和突变毒株，应该引起重视并改进净化防控措施控制ALV-K流行。
2023年06期 v.31;No.156 116-126页 [查看摘要][在线阅读][下载 1852K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：646 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] - 游广炬;阿热阿依·海依拉提;李炜;李晓齐;高丽;曹红;王永强;郑世军;
为研究目前中国临床流行的ALV毒株特征，我们采集临床上ALV P27阳性的鸡的血浆，接种DF-1细胞进行病毒分离，分离出6株外源性ALV毒株，并进一步对分离毒株进行前病毒全基因组测序。结果表明，6个ALV分离株的基因组结构均为典型的复制完整型C型逆转录病毒，缺乏病毒致癌基因，分离株DT190901基因组全长为7473 bp;DT190902和DT190905为7467 bp;DT190903和DT190906为7481 bp;DT190904为7493 bp，分离株间基因组序列同源性较高（98.6%～99.9%）。对6个ALV分离株与其他ALV毒株进行序列比较和遗传进化分析，结果表明，分离株的LTR、gag、pol及gp37基因与内源性ALV相比具有较高同源性（>93.8%）,gp85基因与ALV-K一致性较高（>95.4%），属于新型ALV亚群（K亚群）遗传分支。分离株的LTR序列与内源性ALV相似，比其他外源性ALV亚群缺少一个CAAT Box、PRE Box、Y Box及CArG Box等转录调控元件。结果表明这6个分离株属于ALV-K亚群，为ALV-K与内源性ALV的重组毒株，其LTR序列与内源性ALV接近可能导致其复制能力及致病性降低。遗传进化分析表明，ALV-K已经在我国局部流行，并出现基因重组和突变毒株，应该引起重视并改进净化防控措施控制ALV-K流行。
2023年06期 v.31;No.156 116-126页 [查看摘要][在线阅读][下载 1852K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：646 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] - 游广炬;阿热阿依·海依拉提;李炜;李晓齐;高丽;曹红;王永强;郑世军;
为研究目前中国临床流行的ALV毒株特征，我们采集临床上ALV P27阳性的鸡的血浆，接种DF-1细胞进行病毒分离，分离出6株外源性ALV毒株，并进一步对分离毒株进行前病毒全基因组测序。结果表明，6个ALV分离株的基因组结构均为典型的复制完整型C型逆转录病毒，缺乏病毒致癌基因，分离株DT190901基因组全长为7473 bp;DT190902和DT190905为7467 bp;DT190903和DT190906为7481 bp;DT190904为7493 bp，分离株间基因组序列同源性较高（98.6%～99.9%）。对6个ALV分离株与其他ALV毒株进行序列比较和遗传进化分析，结果表明，分离株的LTR、gag、pol及gp37基因与内源性ALV相比具有较高同源性（>93.8%）,gp85基因与ALV-K一致性较高（>95.4%），属于新型ALV亚群（K亚群）遗传分支。分离株的LTR序列与内源性ALV相似，比其他外源性ALV亚群缺少一个CAAT Box、PRE Box、Y Box及CArG Box等转录调控元件。结果表明这6个分离株属于ALV-K亚群，为ALV-K与内源性ALV的重组毒株，其LTR序列与内源性ALV接近可能导致其复制能力及致病性降低。遗传进化分析表明，ALV-K已经在我国局部流行，并出现基因重组和突变毒株，应该引起重视并改进净化防控措施控制ALV-K流行。
2023年06期 v.31;No.156 116-126页 [查看摘要][在线阅读][下载 1852K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：646 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] - 王娜;张天天;程振涛;文明;王开功;周碧君;
为研究贵州省不同地区、养殖方式、海拔和温度对羊A、O、Asia I型FMD和PPR免疫抗体阳性率的影响。采用酶联免疫吸附实验对2015～2020年本实验室收集的贵州省9个市（州）515个养殖场的羊血清（共计8869份）进行上述疫病的免疫抗体检测，并对检测结果使用易侕统计软件和R语言进行分析。统计结果表明：羊A、O、Asia I型FMD和PPR的免疫抗体平均阳性率分别为42.57%、87.99%、73.64%和64.45%。R语言分析结果表明：羊A、O、Asia I型FMD和PPR免疫抗体阳性率在贵州省的不同地区中差异不显著（P>0.05）；不同养殖方式对羊A、O、Asia I型FMD和PPR的免疫效果影响差异不显著（P>0.05）；不同海拔对羊A、O、Asia I型FMD和PPR的免疫效果影响差异不显著（P>0.05）；不同温度对羊A、O型FMD的免疫效果影响差异极显著（P<0.01)。结果提示，贵州省羊O、Asia I型FMD免疫抗体阳性率达到国家农业部动物疫病监测合格要求，羊A型FMD与PPR免疫抗体阳性率未达到国家农业部动物疫病监测合格要求；温度对羊A、O型FMD的免疫效果影响较大。本研究为贵州省羊A、O、Asia I型FMD疫苗合理免疫程序的制定提供一定的理论依据。
2023年06期 v.31;No.156 127-132页 [查看摘要][在线阅读][下载 1552K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：183 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] - 王娜;张天天;程振涛;文明;王开功;周碧君;
为研究贵州省不同地区、养殖方式、海拔和温度对羊A、O、Asia I型FMD和PPR免疫抗体阳性率的影响。采用酶联免疫吸附实验对2015～2020年本实验室收集的贵州省9个市（州）515个养殖场的羊血清（共计8869份）进行上述疫病的免疫抗体检测，并对检测结果使用易侕统计软件和R语言进行分析。统计结果表明：羊A、O、Asia I型FMD和PPR的免疫抗体平均阳性率分别为42.57%、87.99%、73.64%和64.45%。R语言分析结果表明：羊A、O、Asia I型FMD和PPR免疫抗体阳性率在贵州省的不同地区中差异不显著（P>0.05）；不同养殖方式对羊A、O、Asia I型FMD和PPR的免疫效果影响差异不显著（P>0.05）；不同海拔对羊A、O、Asia I型FMD和PPR的免疫效果影响差异不显著（P>0.05）；不同温度对羊A、O型FMD的免疫效果影响差异极显著（P<0.01)。结果提示，贵州省羊O、Asia I型FMD免疫抗体阳性率达到国家农业部动物疫病监测合格要求，羊A型FMD与PPR免疫抗体阳性率未达到国家农业部动物疫病监测合格要求；温度对羊A、O型FMD的免疫效果影响较大。本研究为贵州省羊A、O、Asia I型FMD疫苗合理免疫程序的制定提供一定的理论依据。
2023年06期 v.31;No.156 127-132页 [查看摘要][在线阅读][下载 1552K] [阅读次数：1 ] |[下载次数：183 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] - 王娜;张天天;程振涛;文明;王开功;周碧君;
为研究贵州省不同地区、养殖方式、海拔和温度对羊A、O、Asia I型FMD和PPR免疫抗体阳性率的影响。采用酶联免疫吸附实验对2015～2020年本实验室收集的贵州省9个市（州）515个养殖场的羊血清（共计8869份）进行上述疫病的免疫抗体检测，并对检测结果使用易侕统计软件和R语言进行分析。统计结果表明：羊A、O、Asia I型FMD和PPR的免疫抗体平均阳性率分别为42.57%、87.99%、73.64%和64.45%。R语言分析结果表明：羊A、O、Asia I型FMD和PPR免疫抗体阳性率在贵州省的不同地区中差异不显著（P>0.05）；不同养殖方式对羊A、O、Asia I型FMD和PPR的免疫效果影响差异不显著（P>0.05）；不同海拔对羊A、O、Asia I型FMD和PPR的免疫效果影响差异不显著（P>0.05）；不同温度对羊A、O型FMD的免疫效果影响差异极显著（P<0.01)。结果提示，贵州省羊O、Asia I型FMD免疫抗体阳性率达到国家农业部动物疫病监测合格要求，羊A型FMD与PPR免疫抗体阳性率未达到国家农业部动物疫病监测合格要求；温度对羊A、O型FMD的免疫效果影响较大。本研究为贵州省羊A、O、Asia I型FMD疫苗合理免疫程序的制定提供一定的理论依据。
2023年06期 v.31;No.156 127-132页 [查看摘要][在线阅读][下载 1552K] [阅读次数：1 ] |[下载次数：183 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] - 周旭东;蒋卫;
人兽共患病危害严重，已引起社会广泛关注，许多动物寄生虫都可以引起人的感染，所以对寄生虫的宿主及其传播途径的研究非常必要。为了解中国西北部内陆干旱荒漠地区啮齿动物体内寄生虫感染情况，对新疆按不同地理分区进行采样调查，共捕获野栖鼠类样本4科15属21种963只。采用病原学方法进行检测，结果共检出33种内寄生虫，其中线虫17种、绦虫15种、棘头虫1种；共检出127只阳性样品，总感染率为13.19%，其中线虫感染率为6.63%，绦虫感染率7.98%。发现该地区鼠类内寄生虫的感染率高低与性别无关，但与宿主年龄、分布地区、宿主种类、季节、集群生活方式密切相关；感染强度与感染寄生虫的种类多少、感染率高低关联度不大，主要和特异性虫种、鼠种关联度较大；寄生虫伴随着鼠类群落演替，从荒漠到人工林、农田、居民区感染率在依次递减，而感染强度在加重，说明内寄生虫从原始荒漠到人工环境传播的方向和途径已经形成。
2023年06期 v.31;No.156 133-139页 [查看摘要][在线阅读][下载 1478K] [阅读次数：3 ] |[下载次数：211 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] - 周旭东;蒋卫;
人兽共患病危害严重，已引起社会广泛关注，许多动物寄生虫都可以引起人的感染，所以对寄生虫的宿主及其传播途径的研究非常必要。为了解中国西北部内陆干旱荒漠地区啮齿动物体内寄生虫感染情况，对新疆按不同地理分区进行采样调查，共捕获野栖鼠类样本4科15属21种963只。采用病原学方法进行检测，结果共检出33种内寄生虫，其中线虫17种、绦虫15种、棘头虫1种；共检出127只阳性样品，总感染率为13.19%，其中线虫感染率为6.63%，绦虫感染率7.98%。发现该地区鼠类内寄生虫的感染率高低与性别无关，但与宿主年龄、分布地区、宿主种类、季节、集群生活方式密切相关；感染强度与感染寄生虫的种类多少、感染率高低关联度不大，主要和特异性虫种、鼠种关联度较大；寄生虫伴随着鼠类群落演替，从荒漠到人工林、农田、居民区感染率在依次递减，而感染强度在加重，说明内寄生虫从原始荒漠到人工环境传播的方向和途径已经形成。
2023年06期 v.31;No.156 133-139页 [查看摘要][在线阅读][下载 1478K] [阅读次数：1 ] |[下载次数：211 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] - 周旭东;蒋卫;
人兽共患病危害严重，已引起社会广泛关注，许多动物寄生虫都可以引起人的感染，所以对寄生虫的宿主及其传播途径的研究非常必要。为了解中国西北部内陆干旱荒漠地区啮齿动物体内寄生虫感染情况，对新疆按不同地理分区进行采样调查，共捕获野栖鼠类样本4科15属21种963只。采用病原学方法进行检测，结果共检出33种内寄生虫，其中线虫17种、绦虫15种、棘头虫1种；共检出127只阳性样品，总感染率为13.19%，其中线虫感染率为6.63%，绦虫感染率7.98%。发现该地区鼠类内寄生虫的感染率高低与性别无关，但与宿主年龄、分布地区、宿主种类、季节、集群生活方式密切相关；感染强度与感染寄生虫的种类多少、感染率高低关联度不大，主要和特异性虫种、鼠种关联度较大；寄生虫伴随着鼠类群落演替，从荒漠到人工林、农田、居民区感染率在依次递减，而感染强度在加重，说明内寄生虫从原始荒漠到人工环境传播的方向和途径已经形成。
2023年06期 v.31;No.156 133-139页 [查看摘要][在线阅读][下载 1478K] [阅读次数：2 ] |[下载次数：211 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ]
- 王倩颖;杨森;刘可欣;王超;孙飞雁;张淑琴;
为了建立牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）的快速定量检测方法，本研究针对IBRV基因组gD序列保守区域设计特异性扩增引物，扩增的目的片段大小为105 bp，将其克隆至pMD18-T载体，构建重组质粒标准品pMD-gD-IBRV，优化反应体系后，建立了快速检测IBRV的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法。该方法特异性较强，与牛病毒性腹泻病毒（BVDV）、牛冠状病毒（BCoV）、牛副流感病毒3型（BPIV3）、牛呼吸道合胞体病毒（BRSV）均无交叉反应；敏感性试验结果显示，该方法敏感性高，对重组质粒标准品的最低检出限达4.8×100copies/μL，高于常规PCR方法；批内、批间重复性试验的变异系数均小于2%，表明该方法重复性良好；该方法检测的样本阳性率高于常规PCR方法，利用该方法检测牛场送检的106份临床样品，结果显示IBRV的阳性率为36.7%，常规PCR检测方法检测显示阳性率为33.0%，二者符合率为96.2%，表明该方法更适用于临床样品检测。本研究建立的IBRV的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好、快速高效，对于IBRV的检测和流行病学调查具有重要意义。
2023年06期 v.31;No.156 140-145页 [查看摘要][在线阅读][下载 1632K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：506 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：11 ] - 王倩颖;杨森;刘可欣;王超;孙飞雁;张淑琴;
为了建立牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）的快速定量检测方法，本研究针对IBRV基因组gD序列保守区域设计特异性扩增引物，扩增的目的片段大小为105 bp，将其克隆至pMD18-T载体，构建重组质粒标准品pMD-gD-IBRV，优化反应体系后，建立了快速检测IBRV的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法。该方法特异性较强，与牛病毒性腹泻病毒（BVDV）、牛冠状病毒（BCoV）、牛副流感病毒3型（BPIV3）、牛呼吸道合胞体病毒（BRSV）均无交叉反应；敏感性试验结果显示，该方法敏感性高，对重组质粒标准品的最低检出限达4.8×100copies/μL，高于常规PCR方法；批内、批间重复性试验的变异系数均小于2%，表明该方法重复性良好；该方法检测的样本阳性率高于常规PCR方法，利用该方法检测牛场送检的106份临床样品，结果显示IBRV的阳性率为36.7%，常规PCR检测方法检测显示阳性率为33.0%，二者符合率为96.2%，表明该方法更适用于临床样品检测。本研究建立的IBRV的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好、快速高效，对于IBRV的检测和流行病学调查具有重要意义。
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为了建立牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）的快速定量检测方法，本研究针对IBRV基因组gD序列保守区域设计特异性扩增引物，扩增的目的片段大小为105 bp，将其克隆至pMD18-T载体，构建重组质粒标准品pMD-gD-IBRV，优化反应体系后，建立了快速检测IBRV的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法。该方法特异性较强，与牛病毒性腹泻病毒（BVDV）、牛冠状病毒（BCoV）、牛副流感病毒3型（BPIV3）、牛呼吸道合胞体病毒（BRSV）均无交叉反应；敏感性试验结果显示，该方法敏感性高，对重组质粒标准品的最低检出限达4.8×100copies/μL，高于常规PCR方法；批内、批间重复性试验的变异系数均小于2%，表明该方法重复性良好；该方法检测的样本阳性率高于常规PCR方法，利用该方法检测牛场送检的106份临床样品，结果显示IBRV的阳性率为36.7%，常规PCR检测方法检测显示阳性率为33.0%，二者符合率为96.2%，表明该方法更适用于临床样品检测。本研究建立的IBRV的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好、快速高效，对于IBRV的检测和流行病学调查具有重要意义。
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非洲猪瘟病毒（ASFV）EP364R蛋白是ASFV的ERCC4核酸酶结构域。为了获得具有免疫原性的EP364R蛋白，本研究将ASFV EP364R基因构建到杆状病毒表达载体上，将重组质粒转座DH10Bac感受态中，经过3次蓝白斑筛选，获得重组BacmidEP364R质粒，将Bacmid-EP364R质粒转染至细胞中，收获上清，在正常细胞中传三代，以获得重组杆状病毒rBac-EP364R。使用Western blot和间接免疫荧光（IFA）实验鉴定重组蛋白得到表达及其免疫原性。本研究结果显示，在感染的细胞可检测到EP364R蛋白的表达，并可被His单克隆抗体特异性识别。结果表明杆状病毒系统成功表达EP364R蛋白并具有良好的反应活性，为后续开展ASFV血清学诊断和亚单位疫苗的研究奠定基础。
2023年06期 v.31;No.156 146-150页 [查看摘要][在线阅读][下载 1495K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：578 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] - 杨扬;张妍;张俊杰;管志欣;李昱昊;孙卿;李宗杰;李蓓蓓;刘珂;邵东华;邱亚峰;魏建超;马志永;
非洲猪瘟病毒（ASFV）EP364R蛋白是ASFV的ERCC4核酸酶结构域。为了获得具有免疫原性的EP364R蛋白，本研究将ASFV EP364R基因构建到杆状病毒表达载体上，将重组质粒转座DH10Bac感受态中，经过3次蓝白斑筛选，获得重组BacmidEP364R质粒，将Bacmid-EP364R质粒转染至细胞中，收获上清，在正常细胞中传三代，以获得重组杆状病毒rBac-EP364R。使用Western blot和间接免疫荧光（IFA）实验鉴定重组蛋白得到表达及其免疫原性。本研究结果显示，在感染的细胞可检测到EP364R蛋白的表达，并可被His单克隆抗体特异性识别。结果表明杆状病毒系统成功表达EP364R蛋白并具有良好的反应活性，为后续开展ASFV血清学诊断和亚单位疫苗的研究奠定基础。
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非洲猪瘟病毒（ASFV）EP364R蛋白是ASFV的ERCC4核酸酶结构域。为了获得具有免疫原性的EP364R蛋白，本研究将ASFV EP364R基因构建到杆状病毒表达载体上，将重组质粒转座DH10Bac感受态中，经过3次蓝白斑筛选，获得重组BacmidEP364R质粒，将Bacmid-EP364R质粒转染至细胞中，收获上清，在正常细胞中传三代，以获得重组杆状病毒rBac-EP364R。使用Western blot和间接免疫荧光（IFA）实验鉴定重组蛋白得到表达及其免疫原性。本研究结果显示，在感染的细胞可检测到EP364R蛋白的表达，并可被His单克隆抗体特异性识别。结果表明杆状病毒系统成功表达EP364R蛋白并具有良好的反应活性，为后续开展ASFV血清学诊断和亚单位疫苗的研究奠定基础。
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本研究以具有高水平禽滑液囊支原体（MS）特异性母源抗体商品蛋鸡作为实验动物，评估了母源抗体对MS减毒活疫苗免疫效果的影响。分别在7日龄、14日龄、21日龄和28日龄免疫MS-H株活疫苗，每周采集腭裂拭子样品，通过荧光定量PCR方法（qPCR）检测MS-H疫苗株基因组拷贝数，以评估疫苗株在体内的定植情况。在28日龄免疫组免疫后5周对各试验组用MS强毒株进行攻毒，连续观察4 w，每周采集腭裂拭子通过qPCR方法检测攻毒菌株基因组拷贝数，以评价疫苗免疫对野毒感染的阻断效果，最后扑杀并剖检所有试验鸡，观察和记录特征性病变。结果表明，MS特异性母源抗体在3周龄时基本降至阴性水平，早期高母源抗体水平对疫苗毒株的定植会产生一定程度的影响，但不同时间免疫组疫苗株均能有效定植，且对强毒株攻毒的保护效果影响不显著。本研究的相关结果对于指导生产中科学制定MS活疫苗的免疫程序具有重要的参考意义。
2023年06期 v.31;No.156 151-154页 [查看摘要][在线阅读][下载 1473K] [阅读次数：1 ] |[下载次数：479 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] - 仲翠微;程敏;何吉鑫;陈杨;陈梦瑶;曹永忠;吴艳涛;张小荣;
本研究以具有高水平禽滑液囊支原体（MS）特异性母源抗体商品蛋鸡作为实验动物，评估了母源抗体对MS减毒活疫苗免疫效果的影响。分别在7日龄、14日龄、21日龄和28日龄免疫MS-H株活疫苗，每周采集腭裂拭子样品，通过荧光定量PCR方法（qPCR）检测MS-H疫苗株基因组拷贝数，以评估疫苗株在体内的定植情况。在28日龄免疫组免疫后5周对各试验组用MS强毒株进行攻毒，连续观察4 w，每周采集腭裂拭子通过qPCR方法检测攻毒菌株基因组拷贝数，以评价疫苗免疫对野毒感染的阻断效果，最后扑杀并剖检所有试验鸡，观察和记录特征性病变。结果表明，MS特异性母源抗体在3周龄时基本降至阴性水平，早期高母源抗体水平对疫苗毒株的定植会产生一定程度的影响，但不同时间免疫组疫苗株均能有效定植，且对强毒株攻毒的保护效果影响不显著。本研究的相关结果对于指导生产中科学制定MS活疫苗的免疫程序具有重要的参考意义。
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本研究以具有高水平禽滑液囊支原体（MS）特异性母源抗体商品蛋鸡作为实验动物，评估了母源抗体对MS减毒活疫苗免疫效果的影响。分别在7日龄、14日龄、21日龄和28日龄免疫MS-H株活疫苗，每周采集腭裂拭子样品，通过荧光定量PCR方法（qPCR）检测MS-H疫苗株基因组拷贝数，以评估疫苗株在体内的定植情况。在28日龄免疫组免疫后5周对各试验组用MS强毒株进行攻毒，连续观察4 w，每周采集腭裂拭子通过qPCR方法检测攻毒菌株基因组拷贝数，以评价疫苗免疫对野毒感染的阻断效果，最后扑杀并剖检所有试验鸡，观察和记录特征性病变。结果表明，MS特异性母源抗体在3周龄时基本降至阴性水平，早期高母源抗体水平对疫苗毒株的定植会产生一定程度的影响，但不同时间免疫组疫苗株均能有效定植，且对强毒株攻毒的保护效果影响不显著。本研究的相关结果对于指导生产中科学制定MS活疫苗的免疫程序具有重要的参考意义。
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研究通过收集2016年9月至2019年9月广西部分地区917例犬瘟热（CD）阳性的病例，从地区、季节、年龄、免疫情况等方面进行了回顾性研究，结果发现：CD在广西冬季（12～2月）发病率最高，为33.48%;2到12个月龄幼犬发病率最高，为81.89%，不同年龄、性别、品种和体型的犬均可发病。采用RT-PCR方法对5份阳性样品的N和H基因进行扩增和遗传进化分析，结果发现：GXLZ20190729和GXNN20160207两株野毒株与东北株的亲缘关系密切，N基因同源性分别为98.8%、99.3%；而GXNN20170528和GXNN20160513与辽宁毒株、北京毒株和黑龙江省毒株在一个小分支，GXNN20160508与长春毒株同在另一个小分支，N基因核苷酸同源性高达98.9%～100.0%；其中GXNN20160528毒株的N基因和H基因与中国辽宁省狐狸源的毒株（LN(10)1）核苷酸同源性均高达100%,H基因氨基酸突变位点一致，并在309位增加了1个糖基化位点。研究表明，本次研究的毒株均为亚洲1型（Asia-1）的强毒谱系，不同毒株间存在遗传多样性。
2023年06期 v.31;No.156 155-163页 [查看摘要][在线阅读][下载 1697K] [阅读次数：2 ] |[下载次数：557 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] - 黄馨;唐盈;戚永乐;周华波;龙剑明;劳月琪;魏知非;石瀚瑜;韦祖樟;欧阳康;黄伟坚;陈樱;
研究通过收集2016年9月至2019年9月广西部分地区917例犬瘟热（CD）阳性的病例，从地区、季节、年龄、免疫情况等方面进行了回顾性研究，结果发现：CD在广西冬季（12～2月）发病率最高，为33.48%;2到12个月龄幼犬发病率最高，为81.89%，不同年龄、性别、品种和体型的犬均可发病。采用RT-PCR方法对5份阳性样品的N和H基因进行扩增和遗传进化分析，结果发现：GXLZ20190729和GXNN20160207两株野毒株与东北株的亲缘关系密切，N基因同源性分别为98.8%、99.3%；而GXNN20170528和GXNN20160513与辽宁毒株、北京毒株和黑龙江省毒株在一个小分支，GXNN20160508与长春毒株同在另一个小分支，N基因核苷酸同源性高达98.9%～100.0%；其中GXNN20160528毒株的N基因和H基因与中国辽宁省狐狸源的毒株（LN(10)1）核苷酸同源性均高达100%,H基因氨基酸突变位点一致，并在309位增加了1个糖基化位点。研究表明，本次研究的毒株均为亚洲1型（Asia-1）的强毒谱系，不同毒株间存在遗传多样性。
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研究通过收集2016年9月至2019年9月广西部分地区917例犬瘟热（CD）阳性的病例，从地区、季节、年龄、免疫情况等方面进行了回顾性研究，结果发现：CD在广西冬季（12～2月）发病率最高，为33.48%;2到12个月龄幼犬发病率最高，为81.89%，不同年龄、性别、品种和体型的犬均可发病。采用RT-PCR方法对5份阳性样品的N和H基因进行扩增和遗传进化分析，结果发现：GXLZ20190729和GXNN20160207两株野毒株与东北株的亲缘关系密切，N基因同源性分别为98.8%、99.3%；而GXNN20170528和GXNN20160513与辽宁毒株、北京毒株和黑龙江省毒株在一个小分支，GXNN20160508与长春毒株同在另一个小分支，N基因核苷酸同源性高达98.9%～100.0%；其中GXNN20160528毒株的N基因和H基因与中国辽宁省狐狸源的毒株（LN(10)1）核苷酸同源性均高达100%,H基因氨基酸突变位点一致，并在309位增加了1个糖基化位点。研究表明，本次研究的毒株均为亚洲1型（Asia-1）的强毒谱系，不同毒株间存在遗传多样性。
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为了解我国猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）混合感染的地区分布情况、季节性特征和混合感染病原类型，基于中国知网数据库，检索猪蓝耳病毒混合感染案例，对2010—2020年我国PRRSV混合感染病例进行统计。结果显示，全国26个省市统计病例共计39 168例，混合感染病例文献共计185篇，PRRSV混合感染的地区分布与我国生猪存栏量的地区相符；在已明确的发病群体中，仔猪发生蓝耳病毒混合感染的比例远高于母猪、保育猪和育肥猪；细菌和病毒是PRRSV混合感染的主要病原，支原体、衣原体和寄生虫在混合感染中占比较少；在与细菌的混合感染中，主要混合感染病原类型为胸膜肺炎放线杆菌，在与病毒的混合感染中，常与猪瘟病毒、伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型、猪流行性腹泻病毒、猪流感病毒进行混合感染，混合感染以三重混合感染（52.99%）为主，二重、四重和五重混合感染分别占病例数的40.05%、6.78%和0.043%。本文归纳了近10年我国PRRSV混合感染的流行情况，为了解PRRSV混合感染及提高疫病综合防控水平提供了一定的参考。
2023年06期 v.31;No.156 164-169页 [查看摘要][在线阅读][下载 1393K] [阅读次数：2 ] |[下载次数：403 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] - 何振欢;
为了解我国猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）混合感染的地区分布情况、季节性特征和混合感染病原类型，基于中国知网数据库，检索猪蓝耳病毒混合感染案例，对2010—2020年我国PRRSV混合感染病例进行统计。结果显示，全国26个省市统计病例共计39 168例，混合感染病例文献共计185篇，PRRSV混合感染的地区分布与我国生猪存栏量的地区相符；在已明确的发病群体中，仔猪发生蓝耳病毒混合感染的比例远高于母猪、保育猪和育肥猪；细菌和病毒是PRRSV混合感染的主要病原，支原体、衣原体和寄生虫在混合感染中占比较少；在与细菌的混合感染中，主要混合感染病原类型为胸膜肺炎放线杆菌，在与病毒的混合感染中，常与猪瘟病毒、伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型、猪流行性腹泻病毒、猪流感病毒进行混合感染，混合感染以三重混合感染（52.99%）为主，二重、四重和五重混合感染分别占病例数的40.05%、6.78%和0.043%。本文归纳了近10年我国PRRSV混合感染的流行情况，为了解PRRSV混合感染及提高疫病综合防控水平提供了一定的参考。
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为了解我国猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）混合感染的地区分布情况、季节性特征和混合感染病原类型，基于中国知网数据库，检索猪蓝耳病毒混合感染案例，对2010—2020年我国PRRSV混合感染病例进行统计。结果显示，全国26个省市统计病例共计39 168例，混合感染病例文献共计185篇，PRRSV混合感染的地区分布与我国生猪存栏量的地区相符；在已明确的发病群体中，仔猪发生蓝耳病毒混合感染的比例远高于母猪、保育猪和育肥猪；细菌和病毒是PRRSV混合感染的主要病原，支原体、衣原体和寄生虫在混合感染中占比较少；在与细菌的混合感染中，主要混合感染病原类型为胸膜肺炎放线杆菌，在与病毒的混合感染中，常与猪瘟病毒、伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型、猪流行性腹泻病毒、猪流感病毒进行混合感染，混合感染以三重混合感染（52.99%）为主，二重、四重和五重混合感染分别占病例数的40.05%、6.78%和0.043%。本文归纳了近10年我国PRRSV混合感染的流行情况，为了解PRRSV混合感染及提高疫病综合防控水平提供了一定的参考。
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- 唐井玉;杜汉宇;贾楠楠;汤傲星;刘春草;朱杰;孟春春;李传峰;刘光清;
干扰素刺激基因15(ISG15)是由病原微生物或干扰素诱导产生的一种大小为15 kDa的泛素样蛋白。在干扰素诱导的数百个干扰素刺激基因中，ISG15是诱导最强烈、最快的ISG蛋白之一。研究表明，ISG15对多种病毒具有抗病毒作用。此外，ISG15在调节宿主损伤、DNA修复，调节信号通路及抗原递呈中也发挥着重要的作用。文章介绍了ISG15的概况，并阐述了近年来ISG15在抗病毒、免疫调节和调节宿主信号通路过程中的作用。
2023年06期 v.31;No.156 170-176页 [查看摘要][在线阅读][下载 1552K] [阅读次数：3 ] |[下载次数：877 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] - 唐井玉;杜汉宇;贾楠楠;汤傲星;刘春草;朱杰;孟春春;李传峰;刘光清;
干扰素刺激基因15(ISG15)是由病原微生物或干扰素诱导产生的一种大小为15 kDa的泛素样蛋白。在干扰素诱导的数百个干扰素刺激基因中，ISG15是诱导最强烈、最快的ISG蛋白之一。研究表明，ISG15对多种病毒具有抗病毒作用。此外，ISG15在调节宿主损伤、DNA修复，调节信号通路及抗原递呈中也发挥着重要的作用。文章介绍了ISG15的概况，并阐述了近年来ISG15在抗病毒、免疫调节和调节宿主信号通路过程中的作用。
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干扰素刺激基因15(ISG15)是由病原微生物或干扰素诱导产生的一种大小为15 kDa的泛素样蛋白。在干扰素诱导的数百个干扰素刺激基因中，ISG15是诱导最强烈、最快的ISG蛋白之一。研究表明，ISG15对多种病毒具有抗病毒作用。此外，ISG15在调节宿主损伤、DNA修复，调节信号通路及抗原递呈中也发挥着重要的作用。文章介绍了ISG15的概况，并阐述了近年来ISG15在抗病毒、免疫调节和调节宿主信号通路过程中的作用。
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血吸虫病是一种严重危害人畜健康和社会经济发展的人兽共患寄生虫病。宿主感染日本血吸虫后，沉积于肝脏的虫卵分泌可溶性虫卵抗原（SEA）主要刺激肝星状细胞（HSC）产生免疫应答反应，导致细胞外基质（ECM）过度沉积，最终引起肝纤维化，造成宿主严重的病理损害。对于血吸虫病晚期患者，即使进行了彻底的杀虫治疗，肝纤维化仍会发展、恶化，而目前尚无有效针对肝纤维化的治疗策略，因此进行肝纤维化的机制研究将对血吸虫病的防治起到积极作用。本文从日本血吸虫病肝纤维化的形成与调节、日本血吸虫病肝纤维化的诊断与治疗等方面进行综述。
2023年06期 v.31;No.156 177-183页 [查看摘要][在线阅读][下载 1443K] [阅读次数：1 ] |[下载次数：1192 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] - 钟昊然;金亚美;
血吸虫病是一种严重危害人畜健康和社会经济发展的人兽共患寄生虫病。宿主感染日本血吸虫后，沉积于肝脏的虫卵分泌可溶性虫卵抗原（SEA）主要刺激肝星状细胞（HSC）产生免疫应答反应，导致细胞外基质（ECM）过度沉积，最终引起肝纤维化，造成宿主严重的病理损害。对于血吸虫病晚期患者，即使进行了彻底的杀虫治疗，肝纤维化仍会发展、恶化，而目前尚无有效针对肝纤维化的治疗策略，因此进行肝纤维化的机制研究将对血吸虫病的防治起到积极作用。本文从日本血吸虫病肝纤维化的形成与调节、日本血吸虫病肝纤维化的诊断与治疗等方面进行综述。
2023年06期 v.31;No.156 177-183页 [查看摘要][在线阅读][下载 1443K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：1192 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] - 钟昊然;金亚美;
血吸虫病是一种严重危害人畜健康和社会经济发展的人兽共患寄生虫病。宿主感染日本血吸虫后，沉积于肝脏的虫卵分泌可溶性虫卵抗原（SEA）主要刺激肝星状细胞（HSC）产生免疫应答反应，导致细胞外基质（ECM）过度沉积，最终引起肝纤维化，造成宿主严重的病理损害。对于血吸虫病晚期患者，即使进行了彻底的杀虫治疗，肝纤维化仍会发展、恶化，而目前尚无有效针对肝纤维化的治疗策略，因此进行肝纤维化的机制研究将对血吸虫病的防治起到积极作用。本文从日本血吸虫病肝纤维化的形成与调节、日本血吸虫病肝纤维化的诊断与治疗等方面进行综述。
2023年06期 v.31;No.156 177-183页 [查看摘要][在线阅读][下载 1443K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：1192 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] - 熊挺;刘定祥;陈瑞爱;
冠状病毒是一类引起动物和人类疾病的有包膜RNA病毒，可导致人和动物发病，危害严重，如严重急性呼吸综合征病毒、中东呼吸综合征病毒、新型冠状病毒等，尤其是2019年末暴发的新型冠状病毒更是呈现全球大流行，严重危害了人健康和阻滞了全球经济发展。而鸡传染性支气管炎病毒和猪流行性腹泻病毒则是2种常见的严重危害家禽和生猪养殖的病原。本文简述了新型冠状病毒、鸡传染性支气管炎病毒和猪流行性腹泻病毒3种冠状病毒的流行趋势，着重介绍了反向遗传学技术在这3种病毒研究中的应用现状，以期能为冠状病毒等单股正链RNA病毒的研究提供一定参考的意义。
2023年06期 v.31;No.156 184-193页 [查看摘要][在线阅读][下载 1655K] [阅读次数：1 ] |[下载次数：1041 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] - 熊挺;刘定祥;陈瑞爱;
冠状病毒是一类引起动物和人类疾病的有包膜RNA病毒，可导致人和动物发病，危害严重，如严重急性呼吸综合征病毒、中东呼吸综合征病毒、新型冠状病毒等，尤其是2019年末暴发的新型冠状病毒更是呈现全球大流行，严重危害了人健康和阻滞了全球经济发展。而鸡传染性支气管炎病毒和猪流行性腹泻病毒则是2种常见的严重危害家禽和生猪养殖的病原。本文简述了新型冠状病毒、鸡传染性支气管炎病毒和猪流行性腹泻病毒3种冠状病毒的流行趋势，着重介绍了反向遗传学技术在这3种病毒研究中的应用现状，以期能为冠状病毒等单股正链RNA病毒的研究提供一定参考的意义。
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冠状病毒是一类引起动物和人类疾病的有包膜RNA病毒，可导致人和动物发病，危害严重，如严重急性呼吸综合征病毒、中东呼吸综合征病毒、新型冠状病毒等，尤其是2019年末暴发的新型冠状病毒更是呈现全球大流行，严重危害了人健康和阻滞了全球经济发展。而鸡传染性支气管炎病毒和猪流行性腹泻病毒则是2种常见的严重危害家禽和生猪养殖的病原。本文简述了新型冠状病毒、鸡传染性支气管炎病毒和猪流行性腹泻病毒3种冠状病毒的流行趋势，着重介绍了反向遗传学技术在这3种病毒研究中的应用现状，以期能为冠状病毒等单股正链RNA病毒的研究提供一定参考的意义。
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猪流感病毒（SIV）在猪群中广泛传播，给养猪业造成重大的经济影响。流感病毒主要是通过病毒基因组的突变和不同来源流感病毒基因组的重新组合来完成自身的进化。通过以上两种方式产生的流感病毒对动物的致病性和传播性会出现显著改变。在这篇综述中，我们对影响SIV致病性和传播性的关键氨基酸位点的突变进行了归纳和分析，为进一步研究SIV的致病机制等方面奠定了基础。
2023年06期 v.31;No.156 194-201页 [查看摘要][在线阅读][下载 1448K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：526 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] - 赵玉仲;王彦哲;考国鑫;桑浩田;韩乐斌;刘思当;肖一红;
猪流感病毒（SIV）在猪群中广泛传播，给养猪业造成重大的经济影响。流感病毒主要是通过病毒基因组的突变和不同来源流感病毒基因组的重新组合来完成自身的进化。通过以上两种方式产生的流感病毒对动物的致病性和传播性会出现显著改变。在这篇综述中，我们对影响SIV致病性和传播性的关键氨基酸位点的突变进行了归纳和分析，为进一步研究SIV的致病机制等方面奠定了基础。
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猪流感病毒（SIV）在猪群中广泛传播，给养猪业造成重大的经济影响。流感病毒主要是通过病毒基因组的突变和不同来源流感病毒基因组的重新组合来完成自身的进化。通过以上两种方式产生的流感病毒对动物的致病性和传播性会出现显著改变。在这篇综述中，我们对影响SIV致病性和传播性的关键氨基酸位点的突变进行了归纳和分析，为进一步研究SIV的致病机制等方面奠定了基础。
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棒状线虫是一类报道寄生于两栖类、爬行类呼吸系统的线虫，在生物学分类上属于小杆目，棒状科，在全球南美洲、亚洲、大洋洲等均有感染野生两栖动物报道。该类线虫对蛙类、蟾蜍等两栖动物规模化养殖业的破坏性较强，潜在的生产风险不容忽视。本文将从近年来国内外已报道的对两栖动物棒状线虫的种类、感染途径、流行概况、临床发病特征、遗传研究、现有检测技术、临床治疗、防控措施等方面的研究进行综述，希望为该类寄生虫在两栖动物中的防治及研究提供重要的理论数据参考。
2023年06期 v.31;No.156 202-208页 [查看摘要][在线阅读][下载 1492K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：217 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] - 黄潇航;李诗艺;贺金峪;王诗晨;李永霞;李梦蕊;张龙;黄志坚;殷光文;
棒状线虫是一类报道寄生于两栖类、爬行类呼吸系统的线虫，在生物学分类上属于小杆目，棒状科，在全球南美洲、亚洲、大洋洲等均有感染野生两栖动物报道。该类线虫对蛙类、蟾蜍等两栖动物规模化养殖业的破坏性较强，潜在的生产风险不容忽视。本文将从近年来国内外已报道的对两栖动物棒状线虫的种类、感染途径、流行概况、临床发病特征、遗传研究、现有检测技术、临床治疗、防控措施等方面的研究进行综述，希望为该类寄生虫在两栖动物中的防治及研究提供重要的理论数据参考。
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棒状线虫是一类报道寄生于两栖类、爬行类呼吸系统的线虫，在生物学分类上属于小杆目，棒状科，在全球南美洲、亚洲、大洋洲等均有感染野生两栖动物报道。该类线虫对蛙类、蟾蜍等两栖动物规模化养殖业的破坏性较强，潜在的生产风险不容忽视。本文将从近年来国内外已报道的对两栖动物棒状线虫的种类、感染途径、流行概况、临床发病特征、遗传研究、现有检测技术、临床治疗、防控措施等方面的研究进行综述，希望为该类寄生虫在两栖动物中的防治及研究提供重要的理论数据参考。
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摩氏摩根菌是人畜共患的条件致病菌，近年来，由摩氏摩根菌引起的人和多种动物的疾病多有报道，严重者甚至引起包括人在内的动物死亡。本文围绕摩氏摩根菌的病原学、流行情况、临床症状、病理变化、病原检测、耐药情况方面进行综述，旨在为摩氏摩根菌的防控提供科学支持。
2023年06期 v.31;No.156 209-215页 [查看摘要][在线阅读][下载 1465K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：754 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] - 廖中华;郝永峰;刘嘉;龚俞;张芸;
摩氏摩根菌是人畜共患的条件致病菌，近年来，由摩氏摩根菌引起的人和多种动物的疾病多有报道，严重者甚至引起包括人在内的动物死亡。本文围绕摩氏摩根菌的病原学、流行情况、临床症状、病理变化、病原检测、耐药情况方面进行综述，旨在为摩氏摩根菌的防控提供科学支持。
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摩氏摩根菌是人畜共患的条件致病菌，近年来，由摩氏摩根菌引起的人和多种动物的疾病多有报道，严重者甚至引起包括人在内的动物死亡。本文围绕摩氏摩根菌的病原学、流行情况、临床症状、病理变化、病原检测、耐药情况方面进行综述，旨在为摩氏摩根菌的防控提供科学支持。
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非洲马瘟（AHS）是由非洲马瘟病毒（AHSV）引起、通过库蠓等吸血昆虫叮咬传播的一种马属动物急性传染病，马属动物中马最易感。本文概述了AHS的病原学概况、临床特征、历史流行及分布情况等，重点汇总分析2015-2020年AHS国际疫情动态及中国周边国家疫情现状，加强AHS监测及综合防控，为严防境外疫情传入提供参考。
2023年06期 v.31;No.156 216-220页 [查看摘要][在线阅读][下载 1350K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：291 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] - 孙冰冰;陈洁;陈凯;张传亮;徐辉;赵灵燕;
非洲马瘟（AHS）是由非洲马瘟病毒（AHSV）引起、通过库蠓等吸血昆虫叮咬传播的一种马属动物急性传染病，马属动物中马最易感。本文概述了AHS的病原学概况、临床特征、历史流行及分布情况等，重点汇总分析2015-2020年AHS国际疫情动态及中国周边国家疫情现状，加强AHS监测及综合防控，为严防境外疫情传入提供参考。
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非洲马瘟（AHS）是由非洲马瘟病毒（AHSV）引起、通过库蠓等吸血昆虫叮咬传播的一种马属动物急性传染病，马属动物中马最易感。本文概述了AHS的病原学概况、临床特征、历史流行及分布情况等，重点汇总分析2015-2020年AHS国际疫情动态及中国周边国家疫情现状，加强AHS监测及综合防控，为严防境外疫情传入提供参考。
2023年06期 v.31;No.156 216-220页 [查看摘要][在线阅读][下载 1350K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：291 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ]