- 刘欢欢;周艳君;姜一峰;张善瑞;童光志;
为研究猪繁殖与呼吸系统综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP3蛋白糖基化位点的作用,在弱毒疫苗株HuN4-F112感染性克隆的基础上,采用点突变的方法对GP3蛋白N29、N42、N50、N131位进行单点或多点组合突变去糖基化,构建了不同糖基化位点的单点和多点突变的PRRSV全长cDNA克隆,最终成功救获N29Q、N42Q、N50Q、N131Q、N29Q/N50Q、N29Q/N195Q六株含糖基化位点突变的病毒,而其余几种糖基化位点突变组合的全长cDNA未能拯救出病毒。对拯救毒株进行滴度测定及多步生长曲线绘制等特性分析,结果显示N29Q、N42Q、N50Q、N131Q位单个糖基化位点的缺失虽不影响子代病毒的产生但会不同程度地降低PRRSV感染细胞的能力,其中N50Q突变体较亲本下降6个滴度且生长明显延迟。多个糖基化位点同时缺失则会影响病毒的拯救,推测这些糖基化位点可能是产生具有感染性病毒粒子所不可或缺的。
2011年03期 v.19;No.81 1-8页 [查看摘要][在线阅读][下载 2349K] [阅读次数：1 ] |[下载次数：261 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] - 王丽;张青婵;赵鹏;武专昌;崔治中;
为制备快速鉴定禽白血病病毒A和B亚群(Avian leukosis virus subgroup A/B,ALV-A/B)的特异性诊断试剂,并鉴定分析ALV-A SDAU09C1株和ALV-B SDAU09C2株抗血清的亚群特异性,将两株病毒的gp85基因进行克隆、原核表达后,免疫家兔分别制备抗ALV-A和ALV-B的血清。血清交叉中和反应显示,SDAU09C1株和SDAU09C2株间的抗原同源性相关系数r=0.366,属于不同亚群;间接免疫荧光表明,两种抗血清均与ALV-A和ALV-B反应,但与ALV-J无反应。结果表明本试验制备的重组蛋白具有较好的反应原性,制备的二种兔抗血清可快速识别ALV-A/B与ALV-J。
2011年03期 v.19;No.81 8-13页 [查看摘要][在线阅读][下载 1523K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：227 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：13 ] - 高博;范志强;韩乃君;张念;张锦霞;王颖;白安斌;黄红梅;扈荣良;吴健敏;
为构建猪瘟重组伪狂犬疫苗,以Tn5转座子为介导,采用体外转座的方法将猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)E2基因和增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluoresce protein,EGFP)的表达盒随机插入伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)基因组中,随后将转座产物转染BHK-21细胞,获得表达E2蛋白和EGFP的病毒库,并对E2蛋白和EGFP在细胞上的表达效果进行PCR鉴定和间接免疫荧光分析。试验结果表明,运用体外转座的方法可以将外源基因插入PRV基因组中,并且外源基因可以在细胞中表达。本研究为重组病毒的研究提供了新思路,并为新型重组猪瘟疫苗的研制进一步奠定了基础。
2011年03期 v.19;No.81 14-18页 [查看摘要][在线阅读][下载 1878K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：218 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] - 黄梦;于海;周艳君;李泽君;马继红;杨馥如;童光志;
利用RT-PCR技术扩增猪流感病毒A/swine/Shanghai/1/07(H1N2)的8个基因片段,分别克隆至双向转录表达载体PBD上,构建出8个能在哺乳细胞中复制和表达的质粒。将8个质粒共转染293T细胞,收取转染48 h时的细胞上清并接种9～11日龄SPF鸡胚,成功拯救出有血凝活性的病毒。经序列测定,确定拯救病毒的8个基因片段均来自猪流感病毒A/swine/Shanghai/1/07(H1N2)基因组。H1N2亚型猪流感病毒反向遗传操作系统的成功建立为猪流感病毒致病机理、传播机制及病毒基因功能的研究奠定了基础;同时,为H1N2亚型猪流感新型疫苗的研制开辟了新的途径。
2011年03期 v.19;No.81 19-22页 [查看摘要][在线阅读][下载 591K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：213 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] - 宋腾飞;赵钦;姚永红;肖一红;周恩民;
为了解山东泰安市猪戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)感染情况及其对职业人群的危害,从山东省某屠宰场共收集来自泰安市的106份猪胆汁样品,利用逆转录套式聚合酶链式反应(reverse transcription nested polymerase chain reaction,RT-nPCR)检测HEV开放阅读框(open reading frame 2,ORF2)保守区基因,其中32份为阳性,阳性率为30.2%。同时随机挑选20个阳性样品克隆测序,并与GenBank上的参考序列进行同源性比较,发现所获得的序列与9株HEV基因Ⅳ型参考序列之间的核苷酸同源性最高,为83.6%～92.8%。其中3株与中国猪源HEV swGX32株(EU366959)亲缘关系近(90.8%),属于4a亚型,另外17株与新疆猪源HEVswCH25株(AY594199)和人源HEVT1株(AJ272108)亲缘关系近(87.9%～92.8%),属于4d亚型。调查结果表明该地区猪戊型肝炎病毒的阳性率很高,而且进一步证实猪源HEV和人源HEV有较高的同源性,对人类的身体健康具有潜在威胁。
2011年03期 v.19;No.81 23-27页 [查看摘要][在线阅读][下载 870K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：130 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：8 ] - 于新友;赵蕾;孙翠萍;沈志强;
根据GenBank中鸡白细胞介素18(inteleukin 18,IL-18)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)基因序列,克隆白来杭鸡IL-18和GM-CSF基因并进行序列分析。结果显示:白来杭鸡IL-18基因开放阅读框为597 bp,编码199个氨基酸,所获得的白来杭鸡IL-18基因与GenBank鸡IL-18的核苷酸同源性为99.0%～99.8%,氨基酸同源性为97.5%～99.5%。白来杭鸡GM-CSF基因开放阅读框为435 bp,编码145个氨基酸,所获得的白来杭鸡GM-CSF基因与GenBank鸡GM-CSF的核苷酸同源性为99.3%～100%,氨基酸同源性为99.3%-100%。IL-18与GM-CSF基因编码的蛋白具有亲水性,都有很强的抗原性。IL-18共有2个潜在的N-糖基化位点,可能存在4个蛋白激酶C磷酸化位点及3个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点。GM-CSF共有1个潜在的N-糖基化位点,可能存在1个蛋白激酶C磷酸化位点及4个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点。本研究结果为进一步研究鸡IL-18、GM-CSF基因表达、生物学活性和应用奠定了基础。
2011年03期 v.19;No.81 28-33页 [查看摘要][在线阅读][下载 1845K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：64 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] - 颜丕熙;李国新;吴晓刚;闫丽萍;滕巧泱;李泽君;
鸭坦布苏病毒是新发现的一种可引起鸭产蛋下降、生长迟缓和死亡的黄病毒。目前尚无可靠的快速诊断方法用于该病毒的检测。本研究根据鸭坦布苏病毒E基因序列,设计了2对重叠引物P1、P2和P3、P4,建立了检测鸭坦布苏病毒的套式RT-PCR方法,该套式RT-PCR比一般PCR敏感性高10倍。采用该方法对安徽省、河北省、山东省、浙江省、上海市等地发病鸭场的63份样品进行了检测,阳性检出率为48/63(76.2%),而病毒分离率仅为13/63(20.6%)。由此表明,与其他方法相比较,本试验所建立的套式RT-PCR方法具有快速、敏感、特异优点,可用于鸭坦布苏病毒的流行病学调查及病毒的检测。
2011年03期 v.19;No.81 34-37页 [查看摘要][在线阅读][下载 703K] [阅读次数：2 ] |[下载次数：959 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：161 ]
- 张旻;傅志强;林矫矫;
蛋白质组学是研究一种细胞、组织或完整生物体在特定时空上全部蛋白质及其存在方式的学科。近年来,应用蛋白质组学技术开展了日本血吸虫尾蚴、童虫、成虫蛋白质组,成虫性别差异和排泄分泌物蛋白质组,体被蛋白质组,与药物和诊断相关的蛋白质组等多方面的研究,增加了人们对日本血吸虫的生长发育、免疫逃避等机制的了解,为发掘血吸虫病疫苗、诊断和药物靶点提供了新的线索。
2011年03期 v.19;No.81 61-68页 [查看摘要][在线阅读][下载 357K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：194 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] - 田德斌;袁世山;
作为动脉炎病毒科成员之一的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV),是一种严重危害世界养猪业的传染病病原。PRRSV如何侵入宿主细胞是病毒学的一个基本但却一直悬而未决的问题,明确该过程对优化设计PRRSV疫苗有重要指导意义。本文拟就PRRSV入侵细胞过程的国内外研究进展作一概述,重点展示细胞受体和病毒结合蛋白的研究动态。
2011年03期 v.19;No.81 68-74页 [查看摘要][在线阅读][下载 354K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：303 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] - 林矫矫;胡述光;刘金明;
本文对家畜血防在中国血吸虫病防控中的作用与地位、家畜/农业血防发展历程以及中国血吸虫病防治科研进展、面临的主要难点与挑战等方面进行了论述,并对今后家畜血防工作提出了建议。
2011年03期 v.19;No.81 75-81页 [查看摘要][在线阅读][下载 361K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：190 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：17 ] - 章力建;杨瑾;朱立志;蔡典雄;杨锐乐;
随着中国国际合作工作的快速发展和农产品质量安全工作的日益重要,建立亚太地区动物源食品质量安全合作机制,是全球食品质量安全合作机制的有益尝试,是十分必要和紧迫的。亚太地区覆盖范围广,国家类型多样,这种机制有利于提高我国农产品质量安全水平和国际竞争力,同时,我国消费者的利益也会得到有效的保护。
2011年03期 v.19;No.81 81-86页 [查看摘要][在线阅读][下载 344K] [阅读次数：0 ] |[下载次数：51 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ]